大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞传代培养可行性研究
日前，南华大学研究生院和湖南省老年医院湖南省老年医学研究所呼吸疾病研究室的研究人员共同发表论文，旨在通过对离体培养的原代细胞和第3代Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cells，AECⅡ)进行分化表型鉴定，探索AECⅡ离体传代培养的可行性。研究指出在适宜的培养条件下，离体培养的第3代AECⅡ能够维持相对稳定的分化表型，可以用于离体实验。该文章发表在2012 年32卷08期《国际呼吸杂志》上。
日前，南华大学研究生院和湖南省老年医院湖南省老年医学研究所呼吸疾病研究室的研究人员共同发表论文，旨在通过对离体培养的原代细胞和第3代Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cells，AECⅡ)进行分化表型鉴定，探索AECⅡ离体传代培养的可行性。研究指出在适宜的培养条件下，离体培养的第3代AECⅡ能够维持相对稳定的分化表型，可以用于离体实验。该文章发表在2012 年32卷08期《国际呼吸杂志》上。
联合应用肺循环灌注、支气管肺泡灌洗、双酶联合螯合剂灌注消化、物理过滤、差速离心、贴壁纯化、免疫吸附等方法分离和纯化大鼠AECⅡ。纯化的AECⅡ接种于基质胶包被的培养在含10μg/L角质细胞生长因子、5％胎牛血清的DMEM/F12培养基中进行离体培养。收集原代和第3培养细胞，透射电镜观察细胞超微结构，免疫细胞化学染色检测肺泡表面活性蛋白A(surfactant protein A，SP-A)表达情况，并进行碱性磷酸酶染色鉴定细胞分化表型。
AECⅡ产量为(21.3±5.8)×106/鼠，活细胞比例为(96.5±0.8)％。细胞培养至第3代，其形态、生长特征与原代培养细胞无明显差异。透射电镜观察证实原代细胞及第3代细胞均具备AECⅡ的特征性结构，SP-A免疫细胞化学染色显示原代细胞及第3代细胞阳性比例均超过95％，碱性磷酸酶染色显示原代细胞及第3代细胞阳性比例分别为(85.2±3.7)％和(90.4±4.2)％。
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