靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响
日前，南京医科大学第一附属医院呼吸科的承柯伟、孙月雯和岳静静等人共同发表论文，旨在通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA)，探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响。研究指出慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达，从而抑制A549细胞增殖，促进其凋亡。由此可见，瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段。该文章发表在2012 年32卷04期《国际呼吸杂志》上。
日前，南京医科大学第一附属医院呼吸科的承柯伟、孙月雯和岳静静等人共同发表论文，旨在通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA)，探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响。研究指出慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达，从而抑制A549细胞增殖，促进其凋亡。由此可见，瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段。该文章发表在2012 年32卷04期《国际呼吸杂志》上。
建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞，分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况。噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1～6 d的生长情况，绘制生长曲线，比较各组细胞增殖差异。流式细胞仪分析各组细胞凋亡率，观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响。RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平。
siRNA-a细胞镜下形态基本正常，5d后荧光效率仍较高，感染稳定，但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢。siRNA-b细胞感染48 h后，镜下见细胞肿胀、变形，空泡出现，5d后见多量细胞碎片，凋亡小体形成，呈现凋亡状态，11d后可见细胞碎片，已近完全凋亡。MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P＜0.01)。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果：siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组。RT-PCR和Western bloting。结果显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调。
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