呼吸

筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株

作者:杨俊岭 整理 来源:金宝搏网站登录技巧 日期:2015-12-18
导读

           近期,辽宁省肿瘤医院生物治疗研究中心研究人员发表论文,旨在N端截短的羧肽酶E(N-terminaltruncatedcarboxypeptidaseE,CPEN)是一个新的肿瘤转移相关蛋白。本研究旨在筛选高表达CPEN的H1299肺癌细胞株,为完成小鼠活体成像实验创造条件。研究指出,筛选出高表达CPEN的H1299肺癌细胞株,为活体成像实验的开展创造了条件,也为进一步解释CPEN促进肿瘤转移

  近期,辽宁省肿瘤医院生物治疗研究中心研究人员发表论文,旨在N端截短的羧肽酶E(N-terminal truncated carboxypeptidase E,CPEΔN)是一个新的肿瘤转移相关蛋白。本研究旨在筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株,为完成小鼠活体成像实验创造条件。研究指出,筛选出高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株,为活体成像实验的开展创造了条件,也为进一步解释CPEΔN促进肿瘤转移的分子机制奠定了基础。该文发表在2015年第06期《中国肺癌杂志》上。

  构建CPEΔN的慢病毒表达载体。分别用CPEΔN慢病毒表达载体或对照慢病毒空载体转染H1299细胞,2μg/m L的嘌呤霉素加压筛选。Western blot分析CPEΔN蛋白的表达,荧光素酶报告基因实验分析荧光素酶对底物的分解作用。

  结果显示, 当感染倍数(multiple of infection,MOI)是20时,慢病毒对H1299细胞的转染效率可以达到80%。CPEΔN高表达H1299细胞株(H1299-CPEΔN)和对照慢病毒载体表达H1299细胞株(H1299-control)中CPEΔN蛋白的表达量为4:1。H1299-CPEΔN和H1299-control均能够有效分解荧光素酶底物,可以满足活体成像实验的需求。

   相关链接:http://c.wanfangdata.com.cn/Periodical-zgfazz.aspx

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