临床实验室随时面临解决疑难病原微生物鉴定的问题,而这类微生物很可能是某种新发传染病的病原体。笔者从本次大会发言和展会上了解到,发达国家一方面致力于开发更快、更实用的多种分子技术,如多重PCR、基因探针、基因芯片、测序、荧光原位杂交(FISH)、质谱等;另一方面全力推动微生物实验室的自动化建设,试图使标本处理、接种、涂片、培养、鉴定和药敏试验实现全部自动化。这与我国大多数实验室仍停留在常规手工操作层面形成对照。当然,也为我们发展快速、灵敏和特异的微生物检验技术提供了信息。
临床实验室随时面临解决疑难病原微生物鉴定的问题,而这类微生物很可能是某种新发传染病的病原体。笔者从本次大会发言和展会上了解到,发达国家一方面致力于开发更快、更实用的多种分子技术,如多重PCR、基因探针、基因芯片、测序、荧光原位杂交(FISH)、质谱等;另一方面全力推动微生物实验室的自动化建设,试图使标本处理、接种、涂片、培养、鉴定和药敏试验实现全部自动化。这与我国大多数实验室仍停留在常规手工操作层面形成对照。当然,也为我们发展快速、灵敏和特异的微生物检验技术提供了信息。
1.常规技术高通量趋势
一些国际知名企业开发了多元化产品,用于感染性疾病、肿瘤、遗传性疾病诊断。PLEX-ID是在核酸质谱技术上发展起来的新一代标本直接分析病原微生物核酸的技术,尤其在解决标本直接鉴定方面令人印象深刻。
2.基因诊断技术优势
主要的研发成果有:集设备与诊断试剂开发为一体的基因探针技术,用于开发检测包括性传播疾病、难辨梭菌、肺结核以及肺炎病原菌和真菌的试剂;多重PCR平台用于检测多种耐药基因;临床应用型深度测序技术等。
3.快速检测技术发展迅速
在快速诊断技术研究中,有公司开发的纳米磁珠粒子使分子标记技术更加灵敏和特异,推动了感染性疾病高通量快速检测。在适合各类实验室应用的FISH技术中,利用肽核酸(PNA)杂交探针的FISH技术开发的血培养阳性或培养后菌落直接染色技术,仅用20分钟即可迅速鉴定常见细菌和酵母样真菌。PNA可以特异性地与DNA或RNA杂交,形成稳定的复合体。PNA由于其自身的特点可以对DNA复制、基因转录、翻译等进行有针对性的调控,同时作为杂交探针提高了检测效率和灵敏度(如图)。
4.微生物实验室自动化
继实验室其他专业自动化后的微生物分析自动化建设,是此次展会的另一亮点。如会议期间展出的WASP全自动微生物分析系统,试图解决从标本处理到鉴定药敏结果全部自动化过程。其他微生物分析自动化、标准化及软件开发方面的研究也琳琅满目,如标本自动去盖和上盖、不同容器处理、高通量、视频监控、平板分类、接种模式、样本前处理、样本溯源性、标准化、接种质量、样本预处理(如震荡混匀、离心)、24小时开机、可随时增加新模块(如革兰染色)等。
传统技术结合分子检测是发达国家普遍采用的手段,在许多实验室可以看到完善的培养技术和新的分子分析技术并存,尤其对疑难病原微生物采用PCR后测序,特异性难培养微生物的基因探针以及多种特异性病原体的多重PCR等应用广泛。
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