重组腺相关病毒载体中残余HEK293细胞蛋白含量检测方法的建立
近期，华侨大学分子药物研究院研究人员发表论文，旨在建立一个可靠的、可供临床应用检测的rAAV2-KAL残余HEK293细胞宿主蛋白（hostcellprotein，HCP）的测试方法。研究指出，本实验成功建立HEK293细胞残余蛋白含量检测的双抗体夹心法ELSA方法，可用于rAAV病毒载体中HEK293宿主细胞蛋白残余含量的检测。该文发表在2016年第01期《中国药学杂志》上。 West
近期，华侨大学分子药物研究院研究人员发表论文，旨在建立一个可靠的、可供临床应用检测的r AAV2-KAL残余HEK293细胞宿主蛋白（host cell protein，HCP）的测试方法。研究指出，本实验成功建立HEK293细胞残余蛋白含量检测的双抗体夹心法ELSA方法，可用于r AAV病毒载体中HEK293宿主细胞蛋白残余含量的检测。该文发表在2016年第01期《中国药学杂志》上。
Western blot方法鉴定r AAV，ELISA方法确定最佳线性范围及最低检测限，验证准确度及精密度。本实验连续生产并用二次氯化铯纯化3批r AAV2-KAL，使用ELISA方法检测r AAV2-KAL所含有的HCP含量，验证超速离心纯化工艺中的适用性。
建立的ELSA方法的最佳线性范围为4～200 ng·m L～（-1），最低检测为4 ng·mL～（-1）；不同浓度的HEK293细胞蛋白抗原回收率77.0%～115.0%，准确度较好；变异系数为8.2%～15.4%均低于20%，显示准确度和精密度均良好；制备的3批r AAV2-KAL经过二次Cs Cl纯化后，HCP含量均低于100 ng·mL～（-1），显示该纯化工艺可有效去除HCP。
相关链接：http://med.wanfangdata.com.cn/Paper/PeriodicalInfo.aspx?periodicalID=zgyxzz
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