近期，军事医学科学院毒物药物研究所研究人员发表论文，旨在探讨亚硫酸氢钠穿心莲内酯（ASB）对人肾小管上皮细胞HK-2的细胞毒性作用。研究指出，ASB对HK-2细胞的毒性作用可能是通过干扰HK-2细胞线粒体能量代谢，改变细胞内氧化还原状态，耗竭细胞内GSH和SOD，导致细胞内ROS大量堆积，引发脂质过氧化作用，破坏细胞膜的通透性，导致Cyt c等凋亡因子从线粒体释放，进而引发细胞凋亡或坏死。该文发表在2015年第03期《中国药理学与毒理学杂志》上。

　　HK-2细胞在DMEM/F12培养液培养24 h后，在经ASB作用2 h前，分别加入N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）10 mmol·L-1、2-氨基-4（丁基磺酸亚氨）-丁酸（BSO）2 mmol·L-1及30 min前分别加入过氧化氢酶（CAT）1000 U·L-1、环孢素A（Cs A）50μmol·L-1，再经ASB作用24 h，MTT法检测细胞存活率；用酶标仪检测乳酸脱氢酶（LDH）和丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、总ATP酶（T-ATP）活性；流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡、线粒体膜电位（MMP）和活性氧（ROS）；Western蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶酶原3、Bcl-2、Bax和细胞色素c（Cyt c）蛋白的表达。

　　结果显示， ASB呈浓度依赖性地抑制HK-2细胞增殖，作用24和48 h后IC50值分别为19.1±3.6和（11.6±3.9）g·L-1。ASB 20 g·L-1处理HK-2细胞24 h后，G2/M期细胞由对照组的（23.3±1.0）%增至（37.0±0.8）%（P<0.01）。与正常对照组相比，ASB组LDH漏出率和ROS水平明显增加，MMP呈下降趋势；与ASB 20 g·L-1组相比，加入还原剂NAC后，细胞存活率和MMP水平明显增加（P<0.05），LDH和ROS水平明显降低（P<0.05）；加入Cs A后，细胞存活率显著降低（P<0.01），LDH和细胞内ROS水平明显增加（P<0.05）。随着ASB浓度增加，HK-2细胞上清液中的MDA水平明显增加，GSH，SOD和T-ATP酶活性逐渐减弱；同时细胞内胱天蛋白酶原3、Bax和Cyt c蛋白表达升高。

　　 相关链接：http://c.wanfangdata.com.cn/Periodical-zgylxydl.aspx