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儿科

PC12细胞氧糖剥夺/再灌注损伤中自噬与凋亡现象

作者:杨艳辉 整理 来源: 日期:2013-01-31
导读

  近日,四川大学华西第二医院儿科研究人员发表论文,旨在观察氧糖剥夺/再灌注(OGD/OGD-R)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞自噬和凋亡的发生及进展。研究指出,OGD/OGD-R均能激活PC12细胞自噬与凋亡,可为探索自噬与凋亡间潜在的串流奠定基础。该文发表在2012年第18期《实用儿科临床杂志》上。

关键字: 自噬 | 凋亡 | PC12 | 氧糖剥夺 | 再灌注

  近日,四川大学华西第二医院儿科研究人员发表论文,旨在观察氧糖剥夺/再灌注(OGD/OGD-R)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞自噬凋亡的发生及进展。研究指出,OGD/OGD-R均能激活PC12细胞自噬与凋亡,可为探索自噬与凋亡间潜在的串流奠定基础。该文发表在2012年第18期《实用儿科临床杂志》上。

  PC12细胞经氧糖剥夺及再灌注处理建立OGD/OGD-R模型,在处理不同时间点,应用流式细胞仪检测OGD组及OGD-R组细胞活性和凋亡率;Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1表达;免疫荧光法观察自噬小体;分别使用自噬上下游抑制剂(3-甲基腺嘌呤、E64 d+pepstatin A)进行调控,观察自噬的波动。

  随着氧糖剥夺时间的延长,OGD组细胞形态损伤逐步加重,凋亡率显著增高,呈时间依赖性;OGD-R组早期细胞活性略有恢复,随着再灌注时程的延长,细胞凋亡率逐渐增高。自噬相关蛋白LC3Ⅱ在OGD短暂处理后其表达即有上升,3h左右达到峰值,6~8h恢复到基础水平;Beclin 1蛋白呈先上升后平稳下降趋势。OGD 3h时间点诱导自噬合并3-甲基腺嘌呤处理后自噬体减少明显;而E64d+pepstatin A可导致LC3Ⅱ的积聚.OGD-R阶段LC3Ⅱ进一步升高至再灌注12 h后开始下降,Beclin 1蛋白表达呈升高趋势并持续至再灌注24h。

  相关链接:http://www.wcbx.cn/MagazineMenu/Index.aspx

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