小分子干扰技术缄默Survivin基因表达对Jurkat细胞凋亡和化疗敏感性的影响
近日，武汉大学人民医院儿科研究人员发表论文，旨在研究应用短发夹RNA（shRNA）技术缄默Survivin基因表达后对白血病细胞株Jurkat细胞凋亡及对化疗药物敏感性的影响。研究指出，Survivin基因对Jurkat细胞生长有重要作用，转染shRNA-Survivin表达质粒能有效抑制细胞Survivin mRNA表达，缄默Survivin基因表达的细胞对化疗药物的敏感性显著增高。该文发表在2012年第15期《实用儿科临床杂志》上。
近日，武汉大学人民医院儿科研究人员发表论文，旨在研究应用短发夹RNA（shRNA）技术缄默Survivin基因表达后对白血病细胞株Jurkat细胞凋亡及对化疗药物敏感性的影响。研究指出，Survivin基因对Jurkat细胞生长有重要作用，转染shRNA-Survivin表达质粒能有效抑制细胞Survivin mRNA表达，缄默Survivin基因表达的细胞对化疗药物的敏感性显著增高。该文发表在2012年第15期《实用儿科临床杂志》上。
构建shRNA-Survivin重组质粒，电击转染至Jurkat细胞，G418筛选得到稳定表达重组质粒的细胞系，反转录（RT）-PCR检测转染细胞中Survivin mRNA表达水平变化，化疗药物长春新碱（VCR）及柔红霉素（DNR）分别作用各转染组细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定各组细胞的增殖抑制率，流式细胞术测定药物对各组细胞的凋亡效应。
DNA测序证实表达质粒构建成功，RT-PCR检测结果显示重组质粒能明显抑制Jurkat细胞Survivin mRNA表达，与对照组及阴性质粒转染组比较，差异均有统计学意义（Pa＜0.05）。VCR及DNR作用转染细胞后，可有效抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡，与对照组及阴性质粒转染组比较，差异均有统计学意义（Pa＜0.05）。
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