目的:探索S100A4和S100A6在大鼠卵巢切除骨质疏松模型中及在成骨细胞分化和破骨细胞分化中表达及意义。 方法: 1、取台州医院患者股骨头标本10例,使用改良TRIZOL法和半定量 RT-PCR方法检测骨组织中S100 mRNA表达情况。 2、选择健康6月龄雌性SD大鼠96只,随机分为双侧卵巢切除组(OVX组)和假手术组(Sham组)。在术后1月、2月、3月、6月时处死大鼠,行股骨HE
目的:探索S100A4和S100A6在大鼠卵巢切除骨质疏松模型中及在成骨细胞分化和破骨细胞分化中表达及意义。
方法:
1、取台州医院患者股骨头标本10例,使用改良TRIZOL法和半定量 RT-PCR方法检测骨组织中S100 mRNA表达情况。
2、选择健康6月龄雌性SD大鼠96只,随机分为双侧卵巢切除组(OVX组)和假手术组(Sham组)。在术后1月、2月、3月、6月时处死大鼠,行股骨HE染色及qCT等检查;通过Real Time RT-PCR方法检测S100A4、S100A6、ALP、TRAP mRNA在卵巢切除术后各时间段的表达情况。
3、将MC3T3-E1细胞分成成骨诱导组和对照组;分别培养3天、7天、14天和21天,检测各时间段的茜素红染色和碱性磷酸酶染色情况;同时收集各时间段细胞,使用TRIZOL法和RealTime RT-PCR方法检测S100A4、S100A6和ALP mRNA表达情况。
4、将RAW264.7接种到含有破骨细胞诱导液的10%小牛血清а-MEM培养液,分别培养0天、1天、3天和5天,通过RealTime RT-PCR的方法检测S100A4、S100A6和TRAP mRNA等表达情况。
结果:
1、人股骨头中S100A4和S100A6 mRNA表达最高,S100A10 mRNA 表达较低,其他S100表达或无表达。
2、与Sham组比较,随着骨量逐渐减少,OVX组中S100A4 mRNA表达在术后1月升高,在术后6月减少(P<0.05);OVX组中S100A6表达在术后1月和2月减少,在术后6月升高(P<0.05);OVX组中ALP mRNA表达在术后1月减少,在术后6月增加(P<0.05);OVX组中TRAP mRNA表达在术后1月到2月增加(P<0.05)。
3、与对照组比较,诱导组中MC3T3-E1细胞内S100A4和S100A6 mRNA均在3天、21天表达升高(P<0.05),诱导组中ALP mRNA在各时间点表达均升高(P<0.05)。
4、随着RAW264.7细胞逐渐分化, S100A4和TRAP mRNA在3天和5天时表达升高 (P<0.05),而S100A6 mRNA在1天和3天时表达升高(P<0.05)。
结论:
1、S100A4和S100A6可能通过影响成骨细胞或破骨细胞功能来调控绝经后骨质疏松症发病机制。
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