NIH/3T3细胞是从小鼠胚胎肾脏分离出的成纤维细胞系,在体外可以分化成纤维细胞。BMP4可在骨骼肌肉内诱发成骨,该过程是软骨化骨的过程。VEGF为血管内皮生长因子,具有体内促进血管形成的作用。本实验的目的是分别从体外和体内实验观察联合应用BMP4和VEGF对NIH/3T3成纤维细胞系生物学行为的影响。 方法: 体外培养NIH/3T3 细胞,应用含有BMP4基因的逆转录病毒转染NIH/
NIH/3T3 细胞是从小鼠胚胎肾脏分离出的成纤维细胞系,在体外可以分化成纤维细胞。BMP4可在骨骼肌肉内诱发成骨,该过程是软骨化骨的过程。VEGF 为血管内皮生长因子,具有体内促进血管形成的作用。本实验的目的是分别从体外和体内实验观察联合应用BMP4和VEGF对NIH/3T3成纤维细胞系生物学行为的影响。
方法: 体外培养NIH/3T3 细胞,应用含有BMP4基因的逆转录病毒转染NIH/3T3 细胞。明确转染成功后,再应用同样的方法转染NIH/3T3-BMP4 细胞。明确转染成功后,收集2×105 NIH/3T3-BMP4-VEGF 细胞。体外3D细胞培养观察VEGF 对NIH/3T3 细胞成骨特性的影响。同时复合在GELFOAM 上,并植入小鼠的股肌袋中来观察细胞的成软骨和成骨的情况。
结果: NIH/3T3-BMP4-VEGF 细胞在体外3D条件下培养后,经组织学处理可见VEGF 明显抑制NIH/3T3 细胞的骨化现象。植入小鼠的股肌袋内可以在植入的不同时期观察到明显的新骨形成,在X线检查下出现阳性信号,H.E组织学检查也可见小鼠股肌袋中有大量的软骨组织的形成。
结论:NIH/3T3 细胞 经携带BMP4 和VEGF 的逆转录病毒两次转染后,其体外和体内的成骨能力均明显减弱,但其植入体内具有增强的成软骨组织的能力。本实验提示,在BMP4 诱导下,NIH/3T3细胞 成骨的能力减弱,但成软骨的能力增强。
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