BMP4可在骨骼肌肉内诱发成骨,该过程是软骨化骨的过程。骨骼肌肉中除了存在有成肌细胞外,同样也有大量的成纤维细胞。NIH/3T3 细胞是从小鼠胚胎肾脏分离出的成纤维细胞系,在体外可以分化成纤维细胞。本实验的目的是分别从体内和体外实验观察BMP4对NIH/3T3成纤维细胞系生物学行为的影响。 方法:体外应用3D 技术培养NIH/3T3 细胞,应用含有不同浓度BMP4 的软骨细胞培养液进行刺激,然后
BMP4可在骨骼肌肉内诱发成骨,该过程是软骨化骨的过程。骨骼肌肉中除了存在有成肌细胞外,同样也有大量的成纤维细胞。NIH/3T3 细胞是从小鼠胚胎肾脏分离出的成纤维细胞系,在体外可以分化成纤维细胞。本实验的目的是分别从体内和体外实验观察BMP4对NIH/3T3成纤维细胞系生物学行为的影响。
方法:体外应用3D 技术培养NIH/3T3 细胞,应用含有不同浓度BMP4 的软骨细胞培养液进行刺激,然后通过Alcian blue 染色和Collagen II检测细胞蛋白多糖和II型胶原 的表达。
体外培养NIH/3T3 细胞,应用含有BMP4基因的逆转录病毒转染NIH/3T3 细胞,明确转染成功后,收集2×105 NIH/3T3-BMP4 细胞复合在GELFOAM 上,后置入小鼠的股肌袋中来观察细胞的成骨情况。
结果:NIH/3T3细胞在体外3D技术培养的条件下经BMP4刺激,可以出现蛋白多糖和II型胶原 染色阳性。
NIH/3T3-BMP4置入小鼠的股肌袋内可以在4周内形成新生的骨组织,可在X线检查下出现阳性信号,4周后的H.E组织学检查也可见大量新生的软骨组织和骨组织形成。
结论:成纤维细胞系NIH/3T3 细胞可在BMP4的诱导下体外向软骨细胞分化,当转染可携带BMP4基因的腺病毒后置入小鼠的股肌袋中后可形成大量的新生软骨组织和骨组织。
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