目的:探讨使用去细胞神经复合脂肪干细胞诱导分化的类施万细胞构建的组织工程神经联合健侧C7神经根移位修复上臂丛损伤的有效性。 方法:模拟人类臂丛损伤的受伤机制,建立符合临床神经根损伤病理特点的臂丛损伤动物模型,并对模型行功能学及组织学评估验证其有效性;取SD大鼠双侧坐骨神经制备去细胞神经,取脂肪组织分离脂肪干细胞并将其诱导为类施万细胞,采用显微注射法构建组织工程神经;取SD大鼠18只,随机
目的:探讨使用去细胞神经复合脂肪干细胞诱导分化的类施万细胞构建的组织工程神经联合健侧C7神经根移位修复上臂丛损伤的有效性。
方法:模拟人类臂丛损伤的受伤机制,建立符合临床神经根损伤病理特点的臂丛损伤动物模型,并对模型行功能学及组织学评估验证其有效性;取SD大鼠双侧坐骨神经制备去细胞神经,取脂肪组织分离脂肪干细胞并将其诱导为类施万细胞,采用显微注射法构建组织工程神经;取SD大鼠18只,随机分为3组(n=6),各组分别采用以下材料桥接:A组,单纯去细胞神经;B组,复合诱导SCLCs的去细胞神经;C组,自体神经(4股隐神经电缆式编织)。术后行一般情况观察;术前及术后2-16周采用grooming test评估实验大鼠前肢肩肘功能的恢复情况;术后16周行电生理检测,测定健侧C7神经根-靶肌肉复合动作电位的潜伏期、传导速度和最大振幅;术后16周,取神经移植体中段行甲苯胺蓝染色和透射电镜观察,测量有髓神经纤维密度、轴突直径和髓鞘厚度;另外,用免疫组织化学染色方法检测神经丝蛋白和S-100蛋白的表达。
结果:所有实验大鼠上臂丛损伤造模成功后立即出现患肢肩肘功能瘫痪症状,观察6d后行健侧C7神经根移位联合神经移植体修复患侧臂丛上干或C5、6神经根;术后16周取材时见所有神经移植体表面均有不同程度的血管化,A、B组较C组与周围组织粘连稍明显;神经移植体两端吻合口连续性良好;术后实验大鼠损伤侧肩肘功能最早恢复时间C组早于B组,B组早于A组,统计学上C组早于A组有统计学意义,但B组和A、C组之间差异没有统计学意义;术后16周各组均不同程度地恢复了肩肘功能,Terzis最大评分C组优于B组,B组优于A组,但差异均无统计学意义;术后16周各组电生理检测最大振幅、潜伏期和传导速度C组优于B组,B组优于A组,但差异均无统计学意义;甲苯胺蓝染色及电镜检测结果显示再生轴突的直径、髓鞘厚度和有髓纤维密度C组优于B组,B组优于A组,其中再生轴突的直径和髓鞘厚度3组间比较均无统计学意义;有髓纤维密度A组与B、C组比较差异有统计学意义,而B组与C组比较无统计学差异。
结论:健侧C7神经根经颈部肌肉浅层移位联合神经移植体桥接患侧臂丛上干可作为研究臂丛损伤再生与修复的可靠模型;健侧C7神经根移位联合组织工程化神经(复合ADSCs诱导分化的SCLCs的去细胞神经,15mm)修复大鼠臂丛上干损伤可有效恢复患肢的肩肘功能。
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