酶预消化组织块贴壁法培养人退变椎间盘髓核细胞
作者：耿一博 整理 来源： 日期：2013-03-12
导读
日前，复旦大学附属中山医院骨科&复旦大学聚合物分子工程国家重点实验室王会仁、袁凤来、段平国等共同发表论文，旨在采用胶原酶预消化组织块贴壁法培养人退变椎间盘髓核细胞，与单纯Ⅱ型胶原酶消化法比较培养效果。研究指出，与单纯Ⅱ形胶原酶消化法比较，Ⅱ型胶原酶预消化后贴壁培养法培养人退变椎间盘髓核细胞成功率高，短时间内可获大量细胞，且强表达Sox-9、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖。该文章发表在2012年第28卷第11期《中华创伤杂志》上。
日前，复旦大学附属中山医院骨科&复旦大学聚合物分子工程国家重点实验室王会仁、袁凤来、段平国等共同发表论文，旨在采用胶原酶预消化组织块贴壁法培养人退变椎间盘髓核细胞，与单纯Ⅱ型胶原酶消化法比较培养效果。研究指出，与单纯Ⅱ形胶原酶消化法比较，Ⅱ型胶原酶预消化后贴壁培养法培养人退变椎间盘髓核细胞成功率高，短时间内可获大量细胞，且强表达Sox-9、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖。该文章发表在2012年第28卷第11期《中华创伤杂志》上。
收集腰椎间盘退变患者的髓核组织分为A、B两组进行培养。A组：体积分数0.025％Ⅱ型胶原酶预消化30 min后组织块接种；B组：体积分数0.025％Ⅱ型胶原酶消化5h后过滤、离心、接种培养。比较两种方法培养成功率和原代细胞融合时间。HE、甲苯胺蓝、免疫细胞荧光染色法观察细胞形态及Sox-9、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达。
结果显示，A、B两组培养成功率差异无统计学意义(P＞0.05)，融合时间A组显著短于B组(P＜0.01)。A组培养的髓核细胞可被甲苯胺蓝染成天蓝色，免疫细胞荧光检测Sox-9、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖呈阳性表达。
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