本研究探究了透明质酸(HA),一种常用的成骨培养基(称为DAG),以及HA和DAG(CG)联合用于人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)成骨分化的作用,以及潜在的研究机制。
本研究探究了透明质酸(HA),一种常用的成骨培养基(称为DAG),以及HA和DAG(CG)联合用于人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)成骨分化的作用,以及潜在的研究机制。
通过流式细胞术和免疫细胞化学染色鉴定hAMSCs的表型。碱性磷酸酶(ALP)和钙沉积测定用于评估hAMSCs的成骨分化。通过定量逆转录PCR(qRT-PCR)和Western印迹分别测定成骨相关基因和蛋白质的表达。同时,通过PCR阵列和qRT-PCR检测hAMSCs成骨分化的分子机制。
结果显示,与DAG处理相比,用CG处理可以显著刺激hAMSC ALP活性和钙沉积,而HA几乎没有效果。在所有三组中,成骨相关分子和干性相关分子的表达在mRNA和蛋白质水平上调,并且这种上调在CG组中最明显。此外,与用DAG处理相比,用CG处理明显增加了参与调节TGF-β/Smad信号传导通路的基因表达。此外,当用SB431542(TGF-β/Smad通路的抑制剂)预处理细胞时,则会显著抑制促成骨分化作用以及在CG处理组中观察到的基因的上调表达。
总之,这些结果表明HA与DAG组合可以显著增强hAMSCs的成骨分化,可能通过TGF-β/Smad信号传导通路。
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