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骨科

聚乙烯亚胺介导基因转染兔脂肪干细胞

作者:王清富 来源: 2015COA论文汇编 日期:2016-04-30
导读

           目的:探讨非病毒载体聚乙烯亚胺(PEI,13KDa,分支型)作为载体介导基因转染脂肪干细胞的可行性。   旨在为基因工程探索一种理想的转染载体。         方法:检测不同浓度下PEI对脂肪干细胞的毒性。Cck8检测不同浓度PEI与ADSCs作用后不同时间点的细胞存活率,推测PEI对ADSCs的细胞毒性,以判断其应用于干细胞基因转染的可行性及可用剂量,以PEI为载体,不同N/P值下将增强

  目的:探讨非病毒载体聚乙烯亚胺(PEI,13KDa,分支型)作为载体介导基因转染脂肪干细胞的可行性。

  旨在为基因工程探索一种理想的转染载体。

  

  

  方法:检测不同浓度下PEI对脂肪干细胞的毒性。Cck8检测不同浓度PEI与ADSCs作用后不同时间点的细胞存活率,推测PEI对ADSCs的细胞毒性,以判断其应用于干细胞基因转染的可行性及可用剂量,以PEI为载体, 不同N/P值下将增强绿色荧光蛋白基因转染脂肪干细胞,荧光显微镜下观察转染后48 h小时转染效果,计算各N/P值下的转染效率,并以lipofectamine2000转染作为对照组。

  

  

  

  结果:当PEI浓度在50μg/ml以内,其对脂肪干细胞的毒性极小,细胞存活率90%以上,浓度100μg/ml以上时,PEI细胞毒性明显增加,这个浓度大大超过常规使用剂量。因此,可以认为PEI(13KDa,分支型)对于ADSCs细胞基本无毒;不同的N/P值转染效率不同,当N/P<6,比值增大转染效率随之增高;当N/P值为6时转染效率最高,此后转染效率随比值的升高而下降。

  

  结论:聚乙烯亚胺(PEI)是一种低价、安全、实用、高效率的基因转染载体,可用于脂肪干细胞基因转染。

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