microRNA-143与ALDH1+CD133+骨肉瘤细胞的存活 及骨肉瘤的耐药性相关
目的：本研究探讨了miR-143对骨肉瘤细胞耐药性的影响及其相关机制。 方法：分别采用RT-PCR和Westernblot技术检测了miR-143的mRNA表达水平和蛋白表达水平，并利用MTT实验和克隆形成实验来研究其对骨肉瘤细胞增殖的影响。通过腺病毒感染建立骨肉瘤细胞中miR-143的过表达，以及采用Hoechst33342染色来检测细胞的凋亡。 结果：骨肉瘤患者肿瘤组织中的mi
目的：本研究探讨了miR-143对骨肉瘤细胞耐药性的影响及其相关机制。
方法：分别采用RT-PCR和Western blot技术检测了miR-143的mRNA表达水平和蛋白表达水平，并利用MTT实验和克隆形成实验来研究其对骨肉瘤细胞增殖的影响。通过腺病毒感染建立骨肉瘤细胞中miR-143的过表达，以及采用Hoechst33342染色来检测细胞的凋亡。
结果：骨肉瘤患者肿瘤组织中的miR-143表达水平降低，且其表达水平的降低与化疗后骨肉瘤患者的生存期缩短有关。在SAOS-2 和 U2OS骨肉瘤细胞耐药性的研究中发现，miR-143 的表达水平显著下调同时伴有ATG2B、Bcl-2以及LC3-II蛋白水平的增加，且ALDH1+CD133+细胞的比例升高，细胞克隆形成数量增加。在野生型p53基因的骨肉瘤U2OS细胞株中，H2O2处理可上调p53和miR-143 的表达，并下调ATG2B、Bcl-2以及LC3-II的表达，但是在缺失型p53基因的SAOS-2细胞株中没有观察到此现象。在骨肉瘤SAOS-2 和 U2OS耐药细胞株中，miR-143的表达增加可显著逆转其耐药性并下调ATG2B、 Bcl-2以及LC3-II的蛋白表达水平。在SAOS-2-Dox 和 U2OS-Dox构建的裸鼠成瘤试验中，miR-143的过表达可抑制肿瘤的生长。miR-143表达的缺失与骨肉瘤患者化疗后的预后不良相关。骨肉瘤细胞的阿霉素耐药性与miR-143表达下调、ALDH1+CD133+细胞活化、自噬作用激活以及细胞凋亡的抑制有关。miR-143在骨肉瘤的耐药性中可能起着非常重要的作用。
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