【目的】骨肉瘤是一种严重危害人类健康的恶性肿瘤，占儿童恶性肿瘤死亡原因第二位。由于其临床表现及影像学存在个体差异，故对骨肉瘤早期明确诊断存在较大的困难。目前用于骨肉瘤诊断的影像学方法包括X线、CT、MRI及骨扫描等，但存在早期诊断缺乏特异性及受患者各种原因限制等问题。有鉴于此，能够在骨肉瘤早期无明显体征的情况下，寻找出一种无创、灵敏度高、无辐射的可诊断该病的影像方法正成为该领域的当务之急。本研究有望首次通过噬菌体展示技术发现更具特异性的UMR106骨肉瘤抗原，将其应用于光声分子影像探针研制中，探索出可早期特异性检测骨肉瘤的高分辨率光声重建影像，为临床早期诊断骨肉瘤开辟一条新途径，具有重要的意义。

　　 【方法】利用噬菌体展示七肽库与大鼠骨肉瘤细胞株UMR106进行3轮全细胞减性筛选；从第3轮筛得的噬菌体中随机挑取30个单克隆，同时从原库中随机挑取噬菌体单克隆做为对照，采用ELISA及细胞免疫化学从噬菌体水平初步鉴定噬菌体单克隆对PT2、 PT6、 PT7这4条多肽并部分标记绿色荧光素异硫氰酸（FITC）；利用细胞免疫荧光鉴定比对4条多肽的特异性及亲和力；利用UMR106细胞构建裸鼠骨肉瘤模型并利用MRI检测骨肉瘤，肿瘤组织HE染色。

　　 【结果】我们利用噬菌体展示七肽库与大鼠骨肉瘤细胞株UMR106进行3轮全细胞筛选，3轮筛选后与UMR106细胞特异性结合的噬菌体富集了1500倍。我们从第3轮筛得的噬菌体中随机挑取30个单克隆，同时从原库中随机挑取噬菌体单克隆做为对照，采用ELISA从噬菌体水平初步鉴定噬菌体单克隆对UMR106的亲和力。ELISA结果显示P/N>2.1的阳性克隆25个，阳性率达83.3%；其中，P/N>2.5以上的有14个克隆，P/N>3.0的克隆有3个，分别为phage-5、phage-16、phage-24。细胞免疫化学结果显示phage-24在UMR106细胞中可见明显染色，空白对照和随机对照组中无明显染色；然而phage-24、空白对照和随机对照组在A549和U6细胞中的染色无明显差别，未见明显染色。将P/N>2.1的25个噬菌体单克隆扩增，提取质粒后测序。测序结果显示，25个噬菌体阳性单克隆插入的外源多肽序列为8 条不同的序列，我们将这8条序列分别命名为PT1-PT8。通过化学方法合成PT1（出现3次、含P/N>3.0高亲和力6号克隆）、PT2（出现4次）、PT6（出现2次、含P/N>3.0高亲和力克隆15号）、PT7号（出现2次、含P/N>3.0高亲和力克隆24号）等四条多肽，部分标记FITC。细胞免疫荧光显示PT6、PT7较其他多肽与大鼠骨肉瘤UMR106细胞的荧光更强。成功构建裸鼠早期的骨肉瘤模型并获得MR影像资料，组织病理学证实为骨肉瘤。

　　 【结论】 利用噬菌体展示技术成功获得UMR-106细胞的特异性多肽，该多肽对UMR106细胞具有高特异性及亲和力，为进一步制作特异性的光声分子影像探针提供实验依据。利用UMR106细胞成功构建早期的骨肉瘤模型。综上，本实验研究为骨肉瘤早期的特异性诊断提供研究基础，对临床早期诊断骨肉瘤开辟一条新途径具有重要的意义。