半月板纤维软骨细胞（meniscal fibrocartilage cells，MFC）与骨髓来源间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）共培养可增强细胞外基质形成，但骨髓来源MSC数量非常有限且取材创伤较大。外周血来源MSC取材较骨髓更微创，获取过程的并发症也更少，并且可以完全实现自体细胞移植的目标，其应用于半月板再生具有极大的临床应用前景。目前还不清楚外周血来源MSC是否也能促进共培养体系中半月板的再生。目的：通过建立MFC和外周血MSC的二维和三维共培养系统研究其对细胞外基质形成和表型的影响。方法：以不同的细胞数目构成比例分为五组：MSC/MFC (100:0, 75:25, 50:50, 25:75, 0:100)。通过CFSE绿色荧光探针和CMTMR红色荧光探针分别标记两种细胞。给予含有TGF-b3的培养液，不同配比的混合细胞分别在常规平面二维培养1周或细胞微团三维培养条件下培养2周。通过光学显微镜观察不同组细胞和微球的大体形态改变。采用激光共聚焦显微镜和FCM检测两种细胞的转归和比例。组织化学、免疫组化和western Blot评估不同细胞比例组分泌的细胞外基质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅹ型胶原、蛋白聚糖的表达及半月板细胞的表型特征。结果：在二维单层培养系统中，MFC和外周血MSC的共培养有利于维持半月板细胞的表性特征；MSC/MFC的比例为50:50时Ⅰ、Ⅱ型胶原表达最强，而蛋白聚糖的表达无明显差异。在三维微团培养系统中，微团的大小及蛋白聚糖的表达随半月板细胞比例的增多而增多；三维培养导致Ⅰ型胶原表达减弱，而Ⅱ、Ⅲ型胶原表达增强；仅单独的MSC组表达Ⅹ型胶原。结论：二维共培养体系有利于半月板细胞表型的维持和基质的合成。在三维共培养体系中半月板细胞表型特征与半月板细胞含量正相关。