芦荟大黄素介导的光动力疗法通过ROS-JNK通路诱导 人骨肉瘤MG63细胞自噬和凋亡
作者：涂平华,黄秋 来源：2015COA论文汇编 日期：2016-03-07
导读
目的:探讨芦荟大黄素(AE)介导的光动力疗法(AE-PDT)对人骨肉瘤MG63细胞活性的影响及其机制。 方法:AE-PDT作用于人骨肉瘤MG63细胞后，采用CCK-8法检测细胞活性的变化，DCFH-DA染色流式细胞术检测细胞活性氧水平，MDC染色荧光显微镜观察细胞的自噬小体，Hoechst细胞核染色荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化，透射电镜观察细胞的超微结构，Annexin V-P
目的:探讨芦荟大黄素(AE)介导的光动力疗法(AE-PDT)对人骨肉瘤MG63细胞活性的影响及其机制。
方法:AE-PDT作用于人骨肉瘤MG63细胞后，采用CCK-8法检测细胞活性的变化，DCFH-DA染色流式细胞术检测细胞活性氧水平，MDC染色荧光显微镜观察细胞的自噬小体，Hoechst细胞核染色荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化，透射电镜观察细胞的超微结构，Annexin V-PI染色流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western blot检测自噬、凋亡及其相关信号通路蛋白的表达情况。
结果:AE-PDT能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的活性，且其抑制作用呈芦荟大黄素浓度-光照能量密度剂量依赖性。AE-PDT能诱导然骨肉瘤MG63细胞产生自噬和凋亡，3-MA抑制自噬后能显著增加细胞的凋亡率。在AE-PDT处理细胞过程中伴随ROS水平升高和JNK的磷酸化激活。用ROS清除剂和JNK抑制剂都能抑制自噬和凋亡产生，ROS清除剂能抑制JNK的磷酸化。
结论:AE-PDT能通过激活ROS-JNK信号途径诱导人骨肉瘤MG63细胞产生自噬和凋亡。并且在AE-PDT作用的早期，自噬可能通过抑制凋亡的发生发挥着细胞保护性作用。
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