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NF-YA促进体外骨肉瘤细胞的侵袭迁移

作者：杜浏学,舒勇,刘志礼来源：2015COA论文汇编日期：2016-02-28

导读

　　目的：构建NF-YA慢病毒载体，转染骨肉瘤细胞，探讨转录因子NF-YA是否促进体外骨肉瘤细胞的侵袭迁移。　　方法：构建pLv/NF-YA、pLv/shNF-YA和Lv-NegNF-YA慢病毒载体，分别转染骨肉瘤U2-OS和HOS细胞系；实时荧光定量PCR分别检测U2-OS和HOS细胞上调和下调后的NF-YA表达量；采用RT-PCR和Western blot技术分别检测两种细胞各组NF

关键字： NF-YA | 骨肉瘤 | 侵袭 | 迁移

目的：构建NF-YA慢病毒载体，转染骨肉瘤细胞，探讨转录因子NF-YA是否促进体外骨肉瘤细胞的侵袭迁移。

方法：构建pLv/NF-YA、pLv/shNF-YA和Lv-NegNF-YA慢病毒载体，分别转染骨肉瘤U2-OS和HOS细胞系；实时荧光定量PCR分别检测U2-OS和HOS细胞上调和下调后的NF-YA表达量；采用RT-PCR和Western blot技术分别检测两种细胞各组NF-YA mRNA和相应蛋白的表达量；采用划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测两种细胞各组的细胞迁徙、侵袭情况。

结果：实时荧光定量PCR检测转染后U2-OS和HOS细胞的NF-YA表达量显著上调和下调。RT-PCR和Western blot检测结果显示：两种细胞中NF-YA上调组NF-YA表达量均显著高于阴性对照组（空载慢病毒组）；NF-YA下调组NF-YA表达量均显著低于阴性对照组。划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示：两种细胞中上调NF-YA组细胞侵袭、迁移能力均显著高于阴性对照组；下调NF-YA组细胞侵袭、迁移能力均显著低于阴性对照组。

结论：转录因子NF-YA可促进体外骨肉瘤细胞的侵袭迁移，为进一步研究其分子机制奠定基础。