目的将BMP2、VEGF165基因稳转入BMSCs，进而检测其成骨分化情况，研究两者各自以及相互间的作用，以求能为骨组织工程治疗大范围骨缺损提供一定理论基础。

方法慢病毒1（携带BMP2、VEGF165、 EGFP和neo）和慢病毒2（携带BMP2、EGFP和neo）分别转染SD MSC，转导48小时后于荧光显微镜下观察转导效果，待两株细胞长至80%融合度时，用0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml 三个浓度的G418进行转染细胞株的纯化筛选，BMP2、VEGF165基因稳转SD MSC细胞株后进行基因及蛋白表达检测， SD MSC/BMP2-VEGF165-EGFP和SD MSC/BMP2 –EGFP两种细胞作为实验组，非感染组作为对照组，每组的细胞进行了3 d、7 d和14 d成骨分化分析。细胞碱性磷酸酶活性检测是由碱性磷酸酶（ALP）测定试剂盒完成。另一方面，三组细胞在成骨分化诱导14天后进行茜素红染色和碱性磷酸酶染色，倒置显微镜拍照。

结果BMP2和VEGF165双基因慢病毒成功稳转SD MSC细胞株，对照组未观察到BMP2和VEGF165基因的mRNA表达，在SD MSC/BMP2组未测量到VEGF165mRNA表达，在SD MSC/BMP2 + VEGF组测量到VEGF165mRNA表达；SD MSC/BMP2和SD MSC/BMP2+VEGF两种细胞均测量到BMP2基因的mRNA表达，两组BMP2的表达没有显著性差异（P>0.05）。免疫印迹分析表明，感染Lv-BMP2-VEGF165和Lv-BMP2骨髓间充质干细胞分泌大量的BMP2，非转染的骨髓间充质干细胞BMP2分泌量极低。所有的细胞，包括转染和或非转染的骨髓间充质干细胞均分泌大量的VEGF165。成骨分化诱导第14天，三组细胞中阳性染色面积最大的是BMP2组，BMP2 + VEGF165 组的阳性染色面积大于对照组，但小于BMP2组，对照组碱性磷酸酶和茜素红染色均为阴性。在三组细胞中，诱导分化后第14天的碱性磷酸酶活性跟第3天和7天差别有显著性差别(P < 0.01)；在诱导分化后第3、7、14天BMP2组ALP活性均显著高于BMP2 + VEGF165 组(P < 0.01)。

结论VEGF165表达抑制BMP2转染的骨髓间质干细胞在体外分化和骨的生成。