目的:通过siRNA对环氧化酶2(COX-2)基因表达的抑制,观察人成骨肉瘤(MG-63)细胞中Bcl-2、Bax及Survivin基因的分子表达情况。 方法:将化学合成的特异性COX-2-siRNA在体外脂质体的介导下转染体外传代培养的人骨肉瘤MG-63细胞,研究时提取对数生长期的骨肉瘤细胞,应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase
目的:通过siRNA对环氧化酶2(COX-2)基因表达的抑制,观察人成骨肉瘤(MG-63)细胞中Bcl-2、Bax及Survivin基因的分子表达情况。
方法:将化学合成的特异性COX-2-siRNA在体外脂质体的介导下转染体外传代培养的人骨肉瘤MG-63细胞,研究时提取对数生长期的骨肉瘤细胞,应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain re-action.RT-PCR)和WB(Western blotting)检测转染前后MG-63细胞中Bcl-2、Bax以及survivin的mRNA表达和蛋白水平的改变。
结果:化学法特异性COX-2-siRNA可有效沉默MG-63细胞中COX-2的基因及蛋白分子表达(P<0.05)并同时影响降低了骨肉瘤MG-63细胞中Survivin、Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平,对Bax的mRNA和蛋白水平有一定的上调作用。
结论:化学合成的特异性COX-2-siRNA能有效充分抑制骨肉瘤MG-63中COX-2的表达,并影响Survivin、Bcl-2在骨肉瘤MG-63细胞中的表达,促使其基因及分子水平下调,对Bax的的基因及分子表达有促进一定促进作用。通过影响骨肉瘤细胞生长、发展环节,诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而发挥体外的抗骨肉瘤作用,能够为分子治疗骨肉瘤提供一条新的研究道路。
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