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携带BMP4和VEGF逆转录病毒联合转染小鼠骨骼肌原代细胞后的体内成骨研究

作者：李广恒,许建中来源：2015COA论文汇编日期：2016-01-31

导读

　　BMP4可在骨骼肌肉内诱发成骨，该过程是软骨化骨的过程。VEGF为血管内皮生长因子，具有体内促进血管形成的作用。本实验的目的是分别从体内实验观察联合应用BMP4和VEGF对小鼠骨骼肌原代细胞生物学行为的影响。　　方法：从C57BL6J 小鼠的臀大肌中通过多酶消化的方法分离出原代细胞（Primary Muscle Cells, PM）。体外培养PM细胞，应用含有BMP4基因的逆转录病毒转染

关键字：：BMP4 | VEGF | 逆转录病毒 | 原代细胞

　　BMP4可在骨骼肌肉内诱发成骨，该过程是软骨化骨的过程。VEGF为血管内皮生长因子，具有体内促进血管形成的作用。本实验的目的是分别从体内实验观察联合应用BMP4和VEGF对小鼠骨骼肌原代细胞生物学行为的影响。

　　方法：从C57BL6J 小鼠的臀大肌中通过多酶消化的方法分离出原代细胞（Primary Muscle Cells, PM）。体外培养PM细胞，应用含有BMP4基因的逆转录病毒转染PM 细胞。明确转染成功后，再应用同样的方法将VEGF基因转染入PM-BMP4 细胞。明确转染成功后，收集2×10⁵PM-BMP4-VEGF 细胞, 复合在GELFOAM 上，并植入小鼠的股肌袋中在术后的不同时间段来观察细胞的成骨情况, 对照组应用2×10⁵未转染VEGF的 PM-BMP4作为对照组。

　　结果: 植入小鼠的股肌袋内PM-BMP4-VEGF 细胞和PM-BMP4均在植入的不同时期可见明显的新骨形成，手术后经X线在不同时期的检查出现阳性信号，两组的成骨量上的结果未见明显的差异。

　　结论：PM 细胞经携带BMP4 和VEGF 的逆转录病毒两次转染后，其体内的成骨能力未出现明显的减弱。VEGF对PM-BMP4组的成骨作用没有明显的作用。