目的:研究应用携带BMP4和sFlt-1基因的逆转录病毒转染骨骼肌干细胞来治疗关节软骨缺损 方法: 体外分离小鼠的骨骼肌肉干细胞 体外分别应用携带有骨形态发生蛋白BMP4,sFlt-1和血管转化生长因子基因的逆转录病毒转染小鼠骨骼肌干细胞。 体外培养分别转染BMP4,sFlt-1,VEGF的细胞向软骨细胞分化。 裸大鼠关节软骨缺损动物模型的建立。 将转染不同基因的细胞
目的:研究应用携带BMP4 和sFlt-1基因的逆转录病毒转染骨骼肌干细胞来治疗关节软骨缺损
方法:
体外分离小鼠的骨骼肌肉干细胞
体外分别应用携带有骨形态发生蛋白BMP4,sFlt-1和血管转化生长因子基因的逆转录病毒转染小鼠骨骼肌干细胞。
体外培养分别转染BMP4, sFlt-1, VEGF的细胞向软骨细胞分化。
裸大鼠关节软骨缺损动物模型的建立。
将转染不同基因的细胞体外与Fibrin glue 复合,并植入大鼠关节软骨缺损的区域,分别在术后4周,8周,16周时检查软骨缺损愈合的结果。
结果:
装载BMP4, sFlt-1, VEGF基因的逆转录病毒可成功地转染小鼠骨骼肌肉干细胞。
sFlt-1转染过的小鼠骨骼肌干细胞比VEGF 转染过的细胞在体外向软骨细胞培养分化能力强。
联合应用BMP4和sFlt1转染细胞组修复关节软骨缺损的能力最强。
结论:
应用骨骼肌肉细胞介导BMP4和sFlt1既可促进软骨修复,同时又可抑制新生软骨组织的血管化。本次试验中,这两方面的作用成功地修复小鼠的关节软骨缺损。本实验为骨骼肌干细胞基础上的多基因治疗促进关节软骨修复提供了理论和实践基础,具有很重要的临床意义。
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