目的:观察骨形成蛋白-2(BMP-2)和成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)对滑膜间充质干细胞向成骨细胞分化的影响。 方法:通过关节镜取正常人滑膜组织,分离后经过胶原酶消化贴壁培养,用免疫磁珠法纯化,并鉴定为滑膜间充质干细胞。种板贴壁24h后,在成骨细胞诱导培养液中加入80g/L BMP-2和1nmol/L FGF-2诱导7、14、21天,在每个时间点对其碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活
目的:观察骨形成蛋白-2(BMP-2)和成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)对滑膜间充质干细胞向成骨细胞分化的影响。
方法:通过关节镜取正常人滑膜组织,分离后经过胶原酶消化贴壁培养,用免疫磁珠法纯化,并鉴定为滑膜间充质干细胞。种板贴壁24h后,在成骨细胞诱导培养液中加入80μg/L BMP-2和1nmol/L FGF-2诱导7、14、21天,在每个时间点对其碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性进行检测,并通过Vonkossa以及茜素红进行染色,同时通过逆转录荧光定量PCR法检测向成骨细胞分化过程中的标志性基因如Runx-2/cbfa-1、ALP、collagen-1、osteocalcin的表达情况。
结果:在光镜下BMP-2刺激组的ALP活性以及钙化结节明显高于对照组,Runx-2/cbfa-1,ALP,collage-1,osteocalcin的mRNA呈高表达;光镜下FGF-2刺激组的ALP活性以及钙化结节也明显高于对照组,Runx-2/cbfa-1、ALP、collagen-1、osteocalcin的mRNA表达量也高于对照组,但FGF-2刺激组升高的水平低于BMP-2刺激组升高的水平。
结论:BMP-2和FGF-2在不同程度上促进滑膜间充质干细胞向成骨细胞方向分化,BMP-2比FGF-2更能促进滑膜间充质干细胞向成骨细胞分化。
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