同位素相对标记技术（iTRAQ)结合双向液相色谱与质谱联用技术应用于膝骨性关节炎血清差异蛋白的实验研究
目的：通过对骨性关节炎K/L分级的各阶段的血清样本进行ITRAQ定量蛋白组学分析检测进行差异蛋白的筛选，以发现骨性关节炎各个时期的的潜在分子标志物。 方法：收集膝关节骨性关节炎患者60例，参照Kellgren-Lawrence(K-L)分级标准，分为K-L0、Ⅱ、Ⅳ级的亚组，每个亚组随机选取10例男性与10例女性。去除血清高丰度蛋白，进行稳定同位素116、117、118的iTRAQ标
目的：通过对骨性关节炎K/L分级的各阶段的血清样本进行iTRAQ定量蛋白组学分析检测进行差异蛋白的筛选，以发现骨性关节炎各个时期的的潜在分子标志物。
方法：收集膝关节骨性关节炎患者60例，参照Kellgren-Lawrence(K-L)分级标准，分为K-L 0、Ⅱ、Ⅳ级的亚组，每个亚组随机选取10例男性与10例女性。去除血清高丰度蛋白，进行稳定同位素116、117、118的iTRAQ标记、反相色谱柱分离、质谱检测及Swissport数据库检索；再利用生物信息学软件进行分析。对的部分差异蛋白进行Western Blot验证。
结果：通过对不同样品的iTRAQ肽段实验标记、Q-star质谱鉴定和MASCOT搜库，共筛选出有意义差异蛋白169个，K-L 0级与K-L Ⅳ级差异蛋白153个；K-L 0级与K-L Ⅱ级差异蛋白153个；K-L Ⅱ级与K-L Ⅳ级差异蛋白145个。Western Blot验证的ADIPOQ、CRP两个差异蛋白与实验ITRAQ定量蛋白组学分析检测的结果相符合。
结论：1.应用iTRAQ技术可筛选出与膝关节骨性关节炎发生发展的多个差异蛋白。提示iTRAQ技术对于膝关节骨性关节炎蛋白质组学血清生物标记物的研究有很好的应用前景。
2.Adiponectin可能是诊断膝关节骨性关节炎早期潜在血清生物标志物。同时指出脂类代谢紊乱可能才是骨性关节炎发病的根本原因。
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