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骨科

铁调素对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的成骨活性的影响以及与JAK2/STAT3通路关系的初步研究

作者:张晓,徐又佳 来源:2015COA论文汇编 日期:2016-01-10
导读

目的:研究铁调素对MC3T3-E1前成骨细胞的活性、成骨相关基因的表达、矿化能力的影响,以及与JAK2/STAT3信号通路关系。 方法:用不同浓度的铁调素(25nmol/L、50nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L)干预MC3T3-E1细胞,48h后用CCK8法检测细胞活性;碱性磷酸酶染色法以及碱性磷酸酶试剂盒分别检测碱性磷酸酶变化;用茜素红钙染色法进行钙结节染色;细胞培养3

目的:研究铁调素对MC3T3-E1前成骨细胞的活性、成骨相关基因的表达、矿化能力的影响,以及与JAK2/STAT3信号通路关系。

方法:用不同浓度的铁调素(25nmol/L、50nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L)干预MC3T3-E1细胞,48h后用CCK8法检测细胞活性;碱性磷酸酶染色法以及碱性磷酸酶试剂盒分别检测碱性磷酸酶变化;用茜素红钙染色法进行钙结节染色;细胞培养3天后用qPCR法检测BGP、RunX2、JAK2、STAT3mRNA表达情况;培养6天后用western blotting检测JAK2蛋白表达情况。

结果:用不同浓度的铁调素干预MC3T3-E1细胞后与空白组相比,活性明显增加,有统计学差异(p<0.05);在第3天和6天后碱性磷酸酶染色以及碱性磷酸酶活性(OD值)干预组与空白对照组未见明显差异;茜素红钙染色结果提示铁调素浓度50nmol/L、100 nmol/L、200nmol/L时钙结节数量较空白组明显增多(p<0.05),其中铁调素浓度在100 nmol/L浓度时钙结节数量最多;qPCR法检测铁调素干预组BGP、RunX2mRNA表达明显增加(p<0.05),其中在100 nmol/L时作用最强,而JAK2、STAT3mRNA表达量明显下降(p<0.01);经铁调素干预后JAK2蛋白表达量也下降。

结论:铁调素能增加成骨细胞活性,促进成骨细胞的分化,增加成骨活性,促进成骨细胞矿化的作用;铁调素能抑制成骨细胞中JAK2、STAT3的表达,铁调素对成骨细胞促成骨作用与JAK2/STAT3通路无关。

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