目的:观察siRNA沉默信号素 4D(Semaphorin 4D, Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。 方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、蛋白免疫印迹检测干扰效率,筛选有效序列。siRNA有效干扰MDA-MB-231细胞Sema 4D表达后,CCK-8法及Transwell迁
目的:观察siRNA沉默信号素 4D(Semaphorin 4D , Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。
方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、蛋白免疫印迹检测干扰效率,筛选有效序列。siRNA有效干扰MDA-MB-231细胞Sema 4D表达后,CCK-8法及Transwell迁移实验检测细胞增殖及迁移能力的变化。
结果:Sema 4D siRNA转染MDA-MB-231细胞后Sema 4D的(mRNA及蛋白)表达水平明显下降(P < 0.05),其中以siRNA-C最明显(P < 0.05);与空白、阴性对照组相比,siRNA-C沉默MDA-MB-231细胞Sema 4D表达可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(均P < 0.05),同时明显减弱细胞的迁移能力[穿膜细胞数:(105.60±12.07) vs(196.20±9.04)、(186.40±6.69),均P < 0.05]。
结论: siRNA沉默Sema 4D可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并抑制细胞迁移,可作为乳腺癌基因治疗的潜在位点。
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