目的:观察独活寄生汤血清对膝骨性关节炎退变软骨细胞Aggrecan、Collagen Ⅹ mRNA表达的影响。方法:6例患者标本均来源于舟山市第一人民医院骨科膝骨性关节炎住院患者,行手术截取的新鲜退变软骨组织,采用组织块法培养原代细胞;MTT法检测传代第一代细胞生长情况,并绘制生长曲线;制备独活寄生汤大鼠含药血清;均取传代第一代的退变软骨细胞,配制独活寄生汤含药血清高浓度组(20%)、中浓
目的:观察独活寄生汤血清对膝骨性关节炎退变软骨细胞Aggrecan、Collagen Ⅹ mRNA表达的影响。方法:6例患者标本均来源于舟山市第一人民医院骨科膝骨性关节炎住院患者,行手术截取的新鲜退变软骨组织,采用组织块法培养原代细胞;MTT法检测传代第一代细胞生长情况,并绘制生长曲线;制备独活寄生汤大鼠含药血清;均取传代第一代的退变软骨细胞,配制独活寄生汤含药血清高浓度组(20%)、中浓度组(10%)、低浓度组(5%)及相应体积比浓度的生理盐水血清作为对照组;MTT法检测不同浓度的独活寄生汤血清对退变软骨细胞增殖的影响;通过实时荧光定量PCR检测不同给药时间点各组退变软骨细胞Aggrecan和Collagen Ⅹ mRNA的表达。结果:退变软骨细胞传代第一代生长曲线见传代第8天时细胞增殖达到顶峰,故选择细胞传代第6天为给药干预时间点;不同浓度的独活寄生汤血清可对退变软骨细胞增殖产生促进作用,尤以中浓度更为明显(P<0.05),与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);与生理盐水血清组比较,不同时间点的独活寄生汤含药血清高浓度组、中浓度组、低浓度组干预后的退变软骨细胞Aggrecan mRNA的表达均上调(P<0.05),Collagen Ⅹ mRNA的表达均下调(P<0.05),且以中浓度的作用最为明显(P<0.05)。结论:独活寄生汤可能通过调节退变软骨组织的胶原及其蛋白多糖的表达而产生延缓膝骨性关节炎退变软骨组织的作用。
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