促肾上腺皮质激素对小鼠骨髓间质干细胞成骨分化的影响
作者：尚国伟,刘宏建,王义生 来源： 2015COA论文汇编 日期：2015-12-11
导读
目的 探讨促肾上腺皮质激素（ACTH）对小鼠骨髓间质干细胞（D1细胞系）成骨分化的影响。 方法 将D1细胞随机分成6组：对照组、对照组+低浓度ACTH组、对照组+高浓度ACTH、成骨组、成骨组+低浓度ACTH组、成骨组+高浓度ACTH组；分组孵育细胞6天后通过Arlizarin Red(茜素红)染色法评价成骨分化；分别孵育细胞1天、3天、6天后，采用实时定量荧光PCR技术定量分析Runx2、AL
目的探讨促肾上腺皮质激素（ACTH）对小鼠骨髓间质干细胞（D1细胞系）成骨分化的影响。
方法将D1细胞随机分成6组：对照组、对照组+低浓度ACTH组、对照组+高浓度ACTH、成骨组、成骨组+低浓度ACTH组、成骨组+高浓度ACTH组；分组孵育细胞6天后通过Arlizarin Red(茜素红)染色法评价成骨分化；分别孵育细胞1天、3天、6天后，采用实时定量荧光PCR技术定量分析Runx2、ALP、MC3R和VEGFa成骨相关基因的表达水平；孵育细胞3天、6天后，采取蛋白印迹（Western Blotting）技术分析成骨分化相关基因Runx2和BSP蛋白表达水平。
结果高浓度ACTH（10-8M）对D1细胞成骨有明显的抑制作用，且在基因水平对成骨基因Runx2、黑色素3蛋白受体（MC3R）及血管内皮生长因子（VEGFa）的表达水平具有抑制作用，在蛋白水平Runx2、BSP基因蛋白表达都有下降的趋势；低浓度ACTH（10-9M）在染色、基因和蛋白表达作用不明显。
结论促肾上腺皮质激素(10-8M)对小鼠骨髓间质干细胞成骨分化有抑制作用，而且在基因水平和蛋白水平对成骨特异性转录因子Runx2 有明显的抑制作用。
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