实时荧光PCR熔解曲线法在β-地中海贫血基因诊断和产前诊断中的临床应用评价
日前，广西柳州市妇幼保健院的严提珍、罗世强和唐宁等人共同发表论文，旨在对荧光PCR熔解曲线法用于β-地中海贫血(β-地贫)基因诊断和产前诊断进行临床评价。研究指出荧光PCR熔解曲线法可同时检测多份待测标本，并可准确检出多种基因突变类型，可用于β-地贫的基因诊断和产前诊断。该文章发表在2012 年35卷05期的《中华检验医学杂志》上。
日前，广西柳州市妇幼保健院的严提珍、罗世强和唐宁等人共同发表论文，旨在对荧光PCR熔解曲线法用于β-地中海贫血(β-地贫)基因诊断和产前诊断进行临床评价。研究指出荧光PCR熔解曲线法可同时检测多份待测标本，并可准确检出多种基因突变类型，可用于β-地贫的基因诊断和产前诊断。该文章发表在2012 年35卷05期的《中华检验医学杂志》上。
收集2011年1至8月柳州市妇幼保健院外周血标本451份，其中经血液学表型分析为β-地贫阳性表型标本372份，β-地贫阴性表型标本79份。同时收集2011年6至9月夫妇双方经PCR-RDB探针法确诊为β-地贫基因携带者，在我院行β-地贫产前诊断的胎儿绒毛、羊水及脐带血标本共84份，其中孕10～ 13周胎儿绒毛标本16份、孕16 ～24周羊水标本64份、孕17周以上胎儿脐血标本4份。按双盲对照试验，分别采用荧光PCR熔解曲线法(可检测24种β珠蛋白基因突变)、PCR-反向点杂交(RDB)探针法(可检测17种β珠蛋白基因突变)和DNA测序法同时对451份外周血标本和84份胎儿绒毛、羊水、脐带血产前诊断标本进行检测。计算荧光PCR熔解曲线法和PCR-RDB探针法、DNA基因测序法检测结果的野生型符合率、突变型符合率和总符合率。
利用荧光熔解曲线法在451份外周血标本中共检出13种突变类型、19种基因型，其中有447份标本与PCR-RDB探针法的基因型检测结果相符，符合率为99.1％ (447/451)，902个等位基因位点检出符合率为99.6％(898/902)，有4份标本与PCR-RDB探针法的基因型检测结果不相符，经DNA测序法验证，有3份标本与荧光熔解曲线法的检测结果完全一致，1份标本的β珠蛋白基因突变不在荧光熔解曲线法检测范围而未被检出。450份外周血标本的荧光熔解曲线法检测结果与DNA测序法相符，符合率为99.8％ (450/451)。利用荧光熔解曲线法在84份产前诊断胎儿标本中共检出8种突变类型、18种基因型,168个等位基因位点的检测结果与PCR-RDB探针法和DNA基因测序法检测结果符合率为100％。
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