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一种稳定高效的新生大鼠皮质神经元原代培养方法

作者：杨俊岭整理来源：日期：2016-03-28

导读

　　近期，宁夏医科大学研究人员发表论文，旨在建立一种稳定、高效、简单可行的新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法。研究指出，该方法操作简单高效，方便可行，结果稳定。该文发表在2015年第04期《神经解剖学杂志》上。　　取新生24h内的SD大鼠，分离皮质，采用木瓜蛋白酶消化、实验前多聚赖氨酸铺板、不同机械吹打次数及细胞接种2h后全量换为添加B-27的NeurobasalA培养基的培养方法，MTT比色

　　近期，宁夏医科大学研究人员发表论文，旨在建立一种稳定、高效、简单可行的新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法。研究指出，该方法操作简单高效，方便可行，结果稳定。该文发表在2015年第04期《神经解剖学杂志》上。

　　取新生24 h内的SD大鼠，分离皮质，采用木瓜蛋白酶消化、实验前多聚赖氨酸铺板、不同机械吹打次数及细胞接种2 h后全量换为添加B-27的Neurobasal A培养基的培养方法，MTT比色法分析检测神经元细胞成活率；于不同时间在倒置相差显微镜下观察细胞的生长状态；利用神经元特异性标志物微管蛋白相关标志物2（microtubule associated protein 2，MAP2）鉴定神经元纯度。

　　结果显示，木瓜蛋白酶明显增加原代培养神经元细胞活力（P<0.01），采用适度的机械吹打、实验前多聚赖氨酸铺板及细胞接种2 h后全量换为添加B-27的Neurobasal A培养基，对神经细胞的活力没有明显的影响（P>0.05）。大部分皮质神经元具有典型的神经元形态特征，经MAP2免疫荧光技术鉴定神经元所占比例达95%以上。