Shh基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的可行性
作者：耿一博 整理 来源：金宝搏网站登录技巧
日期：2012-12-08
导读
中南大学湘雅二医院心胸外科吴晓明、唐滔、杨进福等共同发表论文，旨在探讨Sonic Hedgehog(Shh)基因有效转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的可行性。研究指出，重组真核表达质粒pcDNA3.1-Shh转染大鼠BMSC后能有效表达Shh基因，为进一步Shh基因与细胞联合治疗大鼠心肌缺血模型提供了实验依据。该文章发表在2012年第92卷第10期《中华医学杂志》上。
中南大学湘雅二医院心胸外科吴晓明、唐滔、杨进福等共同发表论文，旨在探讨Sonic Hedgehog(Shh)基因有效转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的可行性。研究指出，重组真核表达质粒pcDNA3.1-Shh转染大鼠BMSC后能有效表达Shh基因，为进一步Shh基因与细胞联合治疗大鼠心肌缺血模型提供了实验依据。该文章发表在2012年第92卷第10期《中华医学杂志》上。
构建pcDNA3.1-Shh真核表达质粒，酶切和测序鉴定。密度梯度离心-贴壁培养法获取Wistar大鼠BMSC，电击穿孔法将pcDNA3.1-Shh、pcDNA3.1(一)空质粒和pmaxGFP报告质粒转染进BMSC，48 h后Western印迹法检测Shh基因的表达情况。
结果显示，酶切和测序结果证实pcDNA3.1-Shh正确性。转染48 h后，荧光显微镜可观察到绿色荧光蛋白(GFP)的表达，有40％以上的细胞发出绿色荧光。Western印迹法检测证实有Shh基因表达，而转染pcDNA3.1(一)空质粒的BBMSC未检测到表达。
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