感染是低收入和资源缺乏国家围产期和婴儿死亡的主要原因，因为这些国家的感染发病率均较高。先天性和围产期感染的最终诊断在很大程度上取决于实验室检测的结果。本研究的目的是开发一种多重嵌套聚合酶链反应(PCR)技术，可用于同时检测怀疑先天性感染病例中的7种基因组中含有与先天性感染相关DNA的病原体。

研究纳入的标准为在产前血清学筛查中，无论是否与胎儿超声异常或胎儿血清学阳性相关，免疫球蛋白M抗体阳性的女性的孕妇。当母亲未参加产前护理的新生儿出现提示感染的症状学和实验室参数时，将其纳入研究。将多重巢式PCR的检测率与母体，胎儿和新生儿血清学以及胎盘免疫组织化学和非商业性扩增进行了比较。

研究结果显示，161例疑似病例中通过多重嵌套PCR可以检测60例(37.3%)，而在医院实验室可用的测试检测到13/ 60(21.7%)，表明多重巢式PCR的检测率高4.6倍(Fisher精确检验，P <.001)。阳性扩增为刚地弓形虫(32例)、巨细胞病毒(14例)、细小病毒B19(5例)、腺病毒(5例)。4例病例同时可检出2种病原菌。所有类型的生物基质均可用于扩增。多重嵌套PCR产物的测序证实了分子生物学的发现。

研究结果表明多重巢式PCR显著增加了先天性感染的诊断数量。由于从羊水和一些新生儿样本中提取的DNA很少，这种多重嵌套PCR允许同时检测7种与先天性感染相关的病原体，以一种可靠、快速、低成本和更敏感的方式。

原始出处：

Lidia Yamamoto, PhD; Antonio G. Amorim Filho, MD, MSc;Performance of a Multiplex Nested Polymerase Chain Reaction in Detecting 7 Pathogens Containing DNA in Their Genomes Associated With Congenital Infections