既往研究表明,细胞表面分子HsTOSO / FAIM3 /HsFcR是在淋巴细胞上表达的IgM特异性Fc受体。本研究显示其细胞外免疫球蛋白样结构域(HsFcR-Igl)可以和IgM /抗原免疫复合物(IC)特异性结合,并利用这一特性开发针对克里米亚-刚果出血热病毒和寨卡病毒(ZIKV)的IgM抗体的新型检测系统(CCHFV)。 研究人员在大肠杆菌表达His-tagged HsFcR-Igl,并通
既往研究表明,细胞表面分子HsTOSO / FAIM3 /HsFcμR是在淋巴细胞上表达的IgM特异性Fc受体。本研究显示其细胞外免疫球蛋白样结构域(HsFcμR-Igl)可以和IgM /抗原免疫复合物(IC)特异性结合,并利用这一特性开发针对克里米亚-刚果出血热病毒和寨卡病毒(ZIKV)的IgM抗体的新型检测系统(CCHFV)。
研究人员在大肠杆菌表达His-tagged HsFcμR-Igl,并通过亲和色谱法、氧化重折叠及凝胶排阻层析法纯化。确认HsFcμR-Ig1与IgM /抗原IC的特异性结合,并开发了用于检测抗CCHFV和抗ZIKV IgM抗体的2种原型ELISA。因此,直接用辣根过氧化物酶(HRP)标记的患者血清和病毒特异性重组抗原在HsFcμR-Ig1包被的ELISA板上共孵育。通过测量显色HRP底物的转换来对结合的IC进行定量。
研究人员对15例经PCR证实的科索沃CCHFV感染患者和28例经PCR证实的巴西ZIKV感染患者的配对血清样本,以及一组CCHFV/ZIKV- igm阴性血清样本进行了检测验证。两种ELISAs都具有很高的可重复性。敏感性和特异性可与公司内部的黄金标准测试和商业试剂盒相媲美,甚至超过商业试剂盒。此外,涂有HsFcμR-Ig1的乳胶珠在与IgM阳性血清和HRP标记的抗原共孵育时聚集,但不与任一组分单独聚集,揭示了在基于聚集的快速测试中使用HsFcμR-Ig1作为捕获分子的潜力。
研究表明,重组HsFcμR-Ig1是用于人和动物来源的IgM /抗原IC的通用捕获分子,并且在将来可以用于基于平板和珠子的血清学测试的开发。
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