解偶联蛋白2过表达张氏肝细胞构建
近日，大连医科大学基础医学院生理教研室关莉莉、王耀锋、宫德正等人共同发表论文，旨在构建稳定过表达人解偶联蛋白2（UCP2）的张氏肝细胞株，观察UCP2对线粒体膜电位（MMP）和活性氧（ROS）的作用。研究指出，成功构建稳定过表达人U CP2的张氏肝细胞株，UCP2表达水平及活性变化可通过MMP和ROS影响线粒体功能。该文发表在2012年第20卷第2期《中华肝脏病杂志》上。
近日，大连医科大学基础医学院生理教研室关莉莉、王耀锋、宫德正等人共同发表论文，旨在构建稳定过表达人解偶联蛋白2（UCP2）的张氏肝细胞株，观察UCP2对线粒体膜电位（MMP）和活性氧（ROS）的作用。研究指出，成功构建稳定过表达人U CP2的张氏肝细胞株，UCP2表达水平及活性变化可通过MMP和ROS影响线粒体功能。该文发表在2012年第20卷第2期《中华肝脏病杂志》上。
将含有人UCP2 cDNA全长的重组质粒（pcDNA3.1-hU CP2）转染张氏肝细胞系，pcDNA3.1空载体作为对照。Zeocin筛选稳定表达UCP2的细胞株，Western blot和免疫细胞化学鉴定UCP2蛋白表达。利用不同剂量UCP2抑制剂京尼平（25、50、100μmol/L），预处理稳定表达UCP2的细胞株。荧光分光光度法检测MMP和ROS水平变化。数据分析用单因素方差分析和q检验（Newman-keuls法）。
pcDNA3.1-hU CP2成功转染张氏肝细胞，UCP2相对表达量约为对照组的1.6倍。过表达细胞罗丹明123和2′，7′——二氯氢化荧光素二脂荧光强度均明显低于正常对照组张氏肝细胞和空载体对照组肝细胞；空载体组上述两指标与正常对照组相比，差异均无统计学意义。京尼平低、中、高剂量组与过表达组相比，罗丹明123的荧光强度和2′，7′——二氯氢化荧光素二脂的荧光强度均明显升高，并呈现剂量依赖性。
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