近日,暨南大学第二临床医学院研究人员发表论文,旨在探讨沉默人抗原R(HuR)基因对人肝癌细胞Hep3B多柔比星化疗敏感性的影响及相关机制。研究指出,沉默HuR基因可能通过抑制耐药蛋白P-gp的表达增强其对多柔比星的化疗敏感性。该文发表在《中华临床医师杂志》2015年第9期上。
近日,暨南大学第二临床医学院研究人员发表论文,旨在探讨沉默人抗原R(HuR)基因对人肝癌细胞Hep3B多柔比星化疗敏感性的影响及相关机制。研究指出,沉默HuR基因可能通过抑制耐药蛋白P-gp的表达增强其对多柔比星的化疗敏感性。该文发表在《中华临床医师杂志》2015年第9期上。
脂质体包裹靶向HuR基因的短发夹RNA(shRNA)转染Hep3B细胞,real-time PCR和Western blot分别检测沉默HuR基因后HuR、MDR1 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测沉默HuR基因后Hep3B细胞对多柔比星化疗的敏感性,流式细胞术(FCM)检测沉默HuR基因后对Hep3B细胞凋亡的影响。
HuR shRNA质粒转染Hep3B细胞能有效沉默HuR基因,mRNA和蛋白水平的抑制率分别为82%和75%。与未处理Hep3B细胞(Mock组)比较,沉默HuR基因的Hep3B细胞(siHuR组)对多柔比星的半数抑制浓度(IC50)显著降低[(86.36±6.54)μg/L vs。(318.56±9.89)μg/L, P<0.05],细胞凋亡率明显升高[(30.48±5.12)%vs。(8.86±1.35)%,P<0.05],MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达显著降低,比值分别为0.36±0.08和0.28±0.11,差异均有统计学意义(P<0.05)。Mock组与转染对照shRNA质粒Hep3B(Control组)的各检测指标均无统计学差异(P>0.05)。
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