法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建和初步鉴定
作者：小田整理 来源： 日期：2015-08-03
导读
近期，西安交通大学医学院第二附属医院刘昀等研究了法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建和初步鉴定，研究发现，所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的 c DNA,为进一步研究法国梧桐花粉主要变应原基因并制备重组标准化法国梧桐花粉主要变应原疫苗奠定基础。该文章发表于2015年06期《山西医科大学学报》上。 该研究旨在构建法国梧桐花粉变应原c DNA表达文库并初步鉴定。 研究者们利用Triz
近期，西安交通大学医学院第二附属医院刘昀等研究了法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建和初步鉴定，研究发现，所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的 c DNA,为进一步研究法国梧桐花粉主要变应原基因并制备重组标准化法国梧桐花粉主要变应原疫苗奠定基础。该文章发表于2015年06期《山西医科大学学报》上。
该研究旨在构建法国梧桐花粉变应原c DNA表达文库并初步鉴定。
研究者们利用Trizol法抽提法国梧桐花粉总RNA,经过Oligo(d T)纤维素柱纯化后分离mRNA,反转录合成ds c DNA,连接EcoRⅠ接头,末端磷酸化,XhoⅠ消化,电泳分离并凝胶回收大于500 bp以上的c DNA片段,与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌,构建c DNA文库,检测文库容量和重组率,并采用PCR方法对插入的c DNA片段大小进行分析。
结果显示，成功构建了一个文库容量为3.5×106pfu/ml,重组率为94%,平均插入片段长度约为0.7 kb的法国梧桐花粉变应原c DNA表达文库。
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