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INT J LAB HEMATOL:液相色谱/串联质谱法同时定量测定活化血小板血清素和凝血素B2方法的建立和验证

作者:MedSci 来源:MedSci原创 日期:2019-02-02
导读

快速有效和可靠的血小板活化试验不仅可避免现有技术的局限性,并且对于诊断肝素诱导血小板减少和血小板分泌障碍将是非常有价值的。

关键字: 凝血素 | | 液相色谱 | |

快速有效和可靠的血小板活化试验不仅可避免现有技术的局限性,并且对于诊断肝素诱导血小板减少和血小板分泌障碍将是非常有价值的。

本研究的第一个目标是开发并验证一种超高效液相色谱串联质谱(UHPLC‐MS/MS)方法,在单次运行中量化血小板中合成的TxB2和释放的血清素。第二个目的是将此方法与光透射聚集术(LTA)相结合,选择合适的血小板应答器用于HIT的诊断。

研究人员通过优化血清素和TxB2同时给药的电喷雾电离和色谱分离。该方法根据欧洲药物管理局(EMA)的生物分析方法验证指南进行了验证。采用单克隆抗CD9(克隆ALB6)作为血小板激活剂进行LTA,以筛选良好的应答。

结果显示,本检测采用串联质谱联用正负电喷雾电离交替进行。总运行时间为6分钟。对该方法的标定曲线、精度、准确度、量化下限、结转、选择性和基体效应进行了验证。在供者中,血小板对ALB6的反应差异很大。

本研究开发并验证了UHPLC‐MS/MS同时定量TxB2和血清素的方法。

原始出处:

Valentine Minet Jonathan Evrard Christelle Vancraeynest,Development and validation of a liquid chromatography/tandem mass spectrometry method for the simultaneous quantification of serotonin and thromboxane B2 from activated platelets

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