汉坦病毒通用型实时荧光定量RT-PCR方法的建立及应用
作者：晓凤 整理 来源： 日期：2016-04-29
导读
近日，研究人员发表论文，旨在建立一种适应汉坦病毒不同基因型别的通用实时荧光定量RT-PCR检测方法。研究指出，建立的通用型实时荧光定量RT-PCR方法灵敏度高，检测的广谱性好，适合啮齿类动物中携带的汉坦病毒的快速检测。该文发表在《现代预防医学》2016年第43卷第2期上。 利用BeaconDesigner7.5软件设计引物和探针，以人工合成汉坦病毒5种具有代表性基因型别的L片段作为模板，
近日，研究人员发表论文，旨在建立一种适应汉坦病毒不同基因型别的通用实时荧光定量RT-PCR检测方法。研究指出，建立的通用型实时荧光定量RT-PCR方法灵敏度高，检测的广谱性好，适合啮齿类动物中携带的汉坦病毒的快速检测。该文发表在《现代预防医学》2016年第43卷第2期上。
利用BeaconDesigner7.5软件设计引物和探针，以人工合成汉坦病毒5种具有代表性基因型别的L片段作为模板，进行实时荧光定量RT-PCR方法的建立，确定所建立方法的检测限及灵敏度并对采集的112份鼠肺进行快速检测。
5种模板RNA的Ct值与其稀释浓度的对数存在良好的线性关系，以HTNV为例建立的标准曲线为:y=-3.40x+46.8，R2=0.99，其最低检出限为5.32 copies/μl，对于不同基因型别的汉坦病毒，其检测最低限:HTNV为12.40 copies/μl、SEOV为5.32 copies/μl、PUUV为15.02 copies/μl、DOBV为22.14 copies/μl及SNV为24.26 copies/μl。对1 12份鼠肺样本的病毒检出率为17.86％，较巢式RT-PCR的检出率(8.04％)高。
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