研究川芎嗪及化学合成的siRNA TGF-b1对大鼠肝星状细胞CTGF表达的影响,为探寻治疗肝纤维化的新方法提供理论依据。
目的 研究川芎嗪及化学合成的siRNATGF-b1对大鼠肝星状细胞CTGF表达的影响,为探寻治疗肝纤维化的新方法提供理论依据。
方法 体外培养大鼠肝星状细胞,从3条siRNA TGF-b1中筛选一条有效的基因沉默片段,然后利用脂质体转染试剂共同转染培养24h的细胞作为转染组(S),并设计空白对照组(B),转染试剂组(R),川芎嗪组(T)及联合治疗组(S+T).收集孵育72h的HSC及培养上清液,采用RT-PCR法、Western blot分别检测细胞I、III型胶原及CTGFmRNA的表达、CTGF蛋白表达、ELISA法检测培养上清液中I、III型胶原含量。
结果 1.RT-PCR检测显示:与空白对照组相比,转染组I、III型胶原及CTGF mRNA表达分别下调(19±3%、32±2%、14±4%,p<0.05-0.01),川芎嗪组分别下调(30±2%、51±2%、25±3%,p<0.05-0.01),联合治疗组分别下调(37±5%、56±3%、36±3%,p<0.05-0.01).空白对照组和转染试剂组比较,两组I型胶原mENA表达差异无显著意义(p>0.05)。2.Western印迹法检测显示:与空白对照组相比,转染组、川芎嗪组及联合治疗组,CTGF蛋白表达分别下调(16.2±3%、25.2±3%、41.6±4%,p<0.05-0.01)。3.ELISA法检测显示:与空白对照组相比,培养上清液中I型胶原含量分别降低(6.1±5%、12±6%、15±5%,p<0.05-0.01),III型胶原含量分别降低(13±3%、24±4%、41±2%,p<0.05-0.01)
结论 siRNA沉默TGF-b1基因能下调CTGF的表达,减少I、III型胶原的表达.川芎嗪也能下调CTGF的表达,但对I、III型胶原表达的抑制作用更加显著,提示川芎嗪抗肝纤维化可能是多种作用靶点。
(摘自2012中国消化系疾病学术大会论文集)
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