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消化

便秘型 大鼠结肠动力及信号通路的改变

作者:华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科 许娟娟 陈艳 钱伟 等 来源:2012CCDD 日期:2012-09-30
导读

以便秘型 大鼠为动物模型,研究 状态下结肠动力,ICC和SCF/Kit信号通路的改变。

关键字: | 结肠传输 | ICC | SCF

  目的 以便秘型大鼠为动物模型,研究 状态下结肠动力,ICCSCF/Kit信号通路的改变。

  方法 20只体重约250-300g的雄性SD(Sprague Dawley)大鼠,购置于华中科技大学同济医学院动物中心。饲养条件为18-22℃,自由饮食水、自由活动。待其适应环境后(通常为一周左右),对其进行造模,具体方法如下:60mg/kg链脲佐菌素腹腔注射用来制作 模型(n=10),于造模8周后处死;相对应的对照组大鼠(n=10)腹腔注射同等剂量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(PH=7.4),分别与同期 大鼠一起处死。同时取出各组大鼠远端结肠组织,然后分别按照免疫组化、实时定量PCR(Real-time polymerase chain reactions, RT-PCR)、Western Blot方法的要求保存标本。分别于造模前、造模后1周、4周和8周记录两组大鼠的血糖和体重;结肠传输时间来评估两组大鼠结肠动力的情况;免疫组化、RT-PCR和Western blot用来评估结肠c-kit和M-SCF的表达情况。腹主动脉采血3ml;Elisa法检测各组大鼠血清中S-SCF的浓度改变。

  结果 (1)基础状态下两组大鼠血糖没有明显差异;造模后第1周、4周和8周, 大鼠血糖相对于正常组显著性升高(P=0.000;P=0.000;P=0.000);(2)基础状态下两组大鼠体重没有明显差异;造模后4周和8周, 大鼠体重相对于正常组而言显著下降(P=0.000;P=0.000);(3)基础状态下两组大鼠结肠传输时间没有明显差异;造模后4周和8周,便秘型 大鼠结肠传输时间相对于正常组而言显著延长(P=0.000;P=0.000)。(4)RT-PCR研究提示 组大鼠结肠c-kit和M-SCF的 mRNA的表达量相对于正常组明显降低(P=0.000;P=0.000)。(5)相对于正常组而言, 组大鼠结肠c-kit阳性表达细胞明显减少;Western blot研究提示 大鼠结肠c-kit和M-SCF蛋白表达量显著下降(P=0.000;P=0.000)。(6) 组大鼠血清S-SCF水平显著下降(P= 0.000)。

  结论 便秘型 大鼠结肠传输减慢,并且伴随ICC的缺失。M-SCF和S-SCF表达量均下降,并且其变化与c-kit表达量呈正相关。

  (摘自2012中国消化系疾病学术大会论文集)

2012CCDD专题链接:http://zt.cmt.com.cn/zt/2012CCDD/index.html

阅读更多消化肝病科内容请点击:http://gi.cmt.com.cn/

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