Wortmannin阻断PI3K/AKT途径对食管癌缺氧诱导因子-1α及糖酵解的影响
近日，上海市松江区中心医院消化科和南京医科大学第一附属医院消化科的研究人员共同发表论文，旨在探讨人食管癌细胞TE1、TE13中应用wortmannin阻断PI3K/AKT通路对缺氧诱导因子（HIF）-1α的抑制效果及对糖酵解相关基因表达的影响，分析PI3K/AKT-HIF-1α途径对食管癌细胞糖酵解通路之间的关系。研究指出，常氧及缺氧条件下，wortmannin能通过抑制食管癌细胞HIF-1α和糖酵解相关基因的表达导致乳酸水平降低，表明PI3K/AKT-HIF-1α途径与食管癌细胞糖酵解通路密切相关。该文
近日，上海市松江区中心医院消化科和南京医科大学第一附属医院消化科的研究人员共同发表论文，旨在探讨人食管癌细胞TE1、TE13中应用wortmannin阻断PI3K/AKT通路对缺氧诱导因子（HIF）-1α的抑制效果及对糖酵解相关基因表达的影响，分析PI3K/AKT-HIF-1α途径对食管癌细胞糖酵解通路之间的关系。研究指出，常氧及缺氧条件下，wortmannin能通过抑制食管癌细胞HIF-1α和糖酵解相关基因的表达导致乳酸水平降低，表明PI3K/AKT-HIF-1α途径与食管癌细胞糖酵解通路密切相关。该文发表在2012年第32卷第3期《中华消化杂志》上。
wortmannin(2μmol/L)预处理食管癌细胞TE1、TE13后常氧和缺氧培养，分为①常氧组(N)；②缺氧组(H)；③常氧处理组(N+W)；④缺氧处理组(H+W)。采用Western印迹检测细胞中HIF-1α蛋白及己糖激酶(HK)-Ⅱ、葡萄糖载体蛋白(GLUT)-1、乳酸脱氢酶(LDH)-A等糖酵解相关基因蛋白的表达；实时定量PCR检测HIF-1α及HK-Ⅱ、GLUT-1、LDH-A等糖酵解相关基因mRNA的表达；分光光度法测定胞液中LDH、HK-Ⅱ活性和培养上清液中乳酸浓度。
常氧状态下，在TE1细胞中存在HIF-1α蛋白的表达，wortmannin(2μmol/L)能抑制HIF-1α蛋白表达，12 h后抑制效应最明显，故选取12 h为后续实验的缺氧时间。TE1、TE13细胞经wortmannin预处理后HIF-1α、HK-Ⅱ、GLUT-1、LDHA蛋白表达较未加药细胞明显减弱；HIF-1α、HK-ⅡmRNA表达较未加药细胞明显减弱。常氧和缺氧条件下加用wortmannin的TE1，TE13组食管癌细胞胞液LDH、HK-Ⅱ活性均较未加药细胞组明显减弱，未加药细胞缺氧后酶活性增强。常氧和缺氧条件下加用wortmannin组较未加药组细胞上清液乳酸浓度明显减低，加wortmannin组细胞缺氧后表达增强。
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