人脐带血浆细胞样树突状细胞亚群的体外诱导及鉴定
研究人员指出，以人CBMC为培养初始细胞，利用Flt3-L与IL-3联合，可成功体外诱导出pDC。
湖南中医药大学第一附属医院传染科研究人员发文，旨在探讨建立浆细胞样树突状细胞(pDC)的体外培养方法。研究人员指出，以人CBMC为培养初始细胞，利用Flt3-L与IL-3联合，可成功体外诱导出pDC。本研究于2015年10月19日在线发表在《临床肝胆病杂志》上。
本研究采集2014年6月-2015年2月于湖南中医药大学第一附属医院就诊的健康产妇脐带血40 ml，分离脐带血单个核细胞(CBMC)，用含重组人FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3-L)100 ng/ml、白细胞介素(IL)3 10 ng/ml 的RPMI1640完全培养基连续培养7 d，每隔1天半换液。第8天加入2 μg/ml的CpG ODN，24 h后收集细胞行流式检测，同时检测pDC培养上清干扰素(IFN)α水平。在培养细胞的第1、3、5、7、8天，观察培养孔中的pDC形态特征变化。
CBMC培养2 h后可见圆形扁平细胞布满视野，24 h后细胞开始贴壁，细胞质伸展开，体积有所增大，圆形，透亮，并可见散在的小集落形成;培养第3~4天，细胞体积较前继续增大，多数为圆形，部分细胞表面可见小的突起，并可见少量梭形、蝌蚪状、星形或其他不规则形的细胞，培养液中集落较前明显增多、增大;培养第5~8天，集落数量及集落内细胞数逐渐减少，而培养液中圆形或具有小突起的悬浮细胞逐渐增多。流式细胞仪检测发现CD123、BDCA-2、BDCA-4均表达阳性的细胞，该细胞为pDC。在培养过程中，pDC比例不断增加，其在培养开始时仅占CBMC总数的1.08%，第 4天升至5.32%，第8天时达到高峰，为19.8%。培养第8天时，pDC培养上清IFNα水平达(11302.61±1745.31)pg/ml。
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