人源性阿尔茨海默病噬菌体单链抗体库的构建
日前，郑州大学第二附属医院神经内科和郑州大学第五附属医院的研究人员共同发表论文，旨在构建人源性阿尔茨海默病（AD）噬菌体单链抗体（scFv）库，为筛选淀粉样蛋白（A1‐42）的人源性特异性抗体奠定基础。 采集18例AD患者的外周血40ml，提取总RNA，应用RT‐PCR法得到人抗体可变区重链（VH）和可变区轻链（VL）基因。将VH和VL由连接肽连接得到scFv片段，将所得片段双酶切后，克
日前，郑州大学第二附属医院神经内科和郑州大学第五附属医院的研究人员共同发表论文，旨在构建人源性阿尔茨海默病（AD）噬菌体单链抗体（scFv）库，为筛选β淀粉样蛋白（Aβ1‐42）的人源性特异性抗体奠定基础。
采集18例AD患者的外周血40 ml ，提取总RNA ，应用RT‐PCR法得到人抗体可变区重链（V H ）和可变区轻链（V L ）基因。将 V H 和 V L 由连接肽连接得到 scFv 片段，将所得片段双酶切后，克隆至pCANTAB5E噬菌体载体，大肠埃希菌TG1感受态细胞经电击转化，辅助噬菌体 M13K07拯救后构建scFv型噬菌体抗体库。
总RNA经逆转录PCR扩增VH和VL可变区基因的凝胶电泳显示，PCR产物长度分别为360 bp和300 bp ，其连接形成的scFv片段长度为750 bp ，最终构建了库容为2．4×109的scFv库。BstNⅠ酶切鉴定构建的scFv库，经凝胶电泳可见，酶切片段长度差异性大，显示scFv库具有良好的多样性。
研究指出，成功构建人源性AD噬菌体scFv库，为进一步筛选Aβ特异性抗体，继而为AD的治疗研究奠定基础。该文发表在2015年11期《中华老年心脑血管病杂志》上。
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