内参基因GAPDH在3T3-L1脂肪细胞分化中的表达变化
近日，上海交通大学医学院附属瑞金医院内分泌代谢病科的张娟、唐红菊和王晓等人共同发表论文，旨在观察甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)在3T3-L1脂肪细胞分化过程中表达水平是否存在变化，并与其他常用的内参基因相比较。研究指出GAPDH在3T3-L1脂肪细胞分化过程中表达增加，不适合作为内参。该文章发表在2012年28卷10期的《中华内分泌代谢杂志》上。
近日，上海交通大学医学院附属瑞金医院内分泌代谢病科的张娟、唐红菊和王晓等人共同发表论文，旨在观察甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)在3T3-L1脂肪细胞分化过程中表达水平是否存在变化，并与其他常用的内参基因相比较。研究指出GAPDH在3T3-L1脂肪细胞分化过程中表达增加，不适合作为内参。该文章发表在2012年28卷10期的《中华内分泌代谢杂志》上。
以实时定量PCR检测3T3-L1脂肪细胞分化0、1、3、5、7 d几种不同常见内参基因的表达是否存在变化，并以Western印迹方法进行证实。
结果：(1)内参基因GAPDH和转铁蛋白受体(TFRC)在脂肪细胞分化过程中基因表达水平逐渐明显升高，其中GAPDH mRNA在脂肪细胞分化1、3、5、7 d分别增加5.7、7.6、22.0和24.5倍(均P<0.01)，β-actin、α-微管蛋白(α-tubulin)、肽酰脯氨酰异构酶(PIPA)和18S mRNA表达水平未见明显改变；采用实时定量PCR检测脂肪细胞分化的关键转录因子PPARγ2、CCAAT/增强结合蛋白(C/EBP)α和C/EBPβ的表达时，以GAPDH作内参明显低估他们的表达变化；GAPDH蛋白表达也随着脂肪细胞分化逐渐增加，β-actin、α-tubulin蛋白表达未见明显变化；(2)小檗碱明显抑制脂肪细胞分化过程中GAPDH mRNA和蛋白的表达，在脂肪细胞分化5、7 d时GAPDH mRNA表达水平分别降低68.1%和66.3%(P<0.05或P<0.01)，但小檗碱对其他内参基因的表达无明显改变。
相关文章
评论
我要跟帖
.jpg)
