CD40-siRNA慢病毒载体的构建及其对小鼠巨噬细胞的感染
近期，内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院风湿免疫科研究人员发表论文，旨在构建CD40-siRNA慢病毒载体，检测其对小鼠巨噬细胞J774.1的感染效率及测定J774.1细胞的CD40mRNA水平。研究指出，慢病毒感染J774.1细胞的效率可以满足后续实验的要求，CD40-siRNA慢病毒载体可以抑制CD40mRNA的表达。该文发表在2015年第08期《贵阳医学院学报》杂志上。 设计1段
近期，内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院风湿免疫科研究人员发表论文，旨在构建CD40-siRNA慢病毒载体，检测其对小鼠巨噬细胞J774.1的感染效率及测定J774.1细胞的CD40 mRNA水平。研究指出，慢病毒感染J774.1细胞的效率可以满足后续实验的要求，CD40-siRNA慢病毒载体可以抑制CD40mRNA的表达。该文发表在2015年第08期《贵阳医学院学报》杂志上。
设计1段CD40的siRNA序列，构建慢病毒载体p LL3.7-CD40-siRNA，与p MD2.G、p MDLg/pRRE和pRSV-REV按比例采用Lipofectamine LTX&Plus共转染293T细胞制备病毒，感染J774.1细胞后第4、6和8天时用流式细胞仪检测其感染效率，实时荧光定量RT-PCR（qRT-PCR）检测CD40mRNA的表达水平。
成功构建CD40-siRNA慢病毒载体，当p LL3.7-CD40-siRNA、p MD2.G、p MDL g/p RRE和与pRSV-REV的比例为2∶1∶1∶1时，制备的慢病毒滴度最高；慢病毒感染J774.1细胞的效率呈时间依赖性，感染第8天时的感染效率最高；同时，p LL3.7-CD40-siRNA组CD40 mRNA的表达明显低于p LL3.7空载体组，差异有统计学意义（P<0.05）。
相关链接：http://med.wanfangdata.com.cn/Periodical/gyyxyxb
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