柱上切除GST标签制备幽门螺杆菌Lpp20蛋白
作者：陈小姣 整理 来源：金宝搏网站登录技巧
日期：2012-11-18
导读
近日，南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所的姜茵、王小平和何殿殿等人共同发表论文，旨在表达幽门螺杆菌Lpp20-GST融合蛋白，获取切除GST标签的重组蛋白。研究指出凝血酶柱上切除GST标签获得目的蛋白。该文章发表在2012年07期的《中国公共卫生》上。
近日，南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所的姜茵、王小平和何殿殿等人共同发表论文，旨在表达幽门螺杆菌Lpp20-GST融合蛋白，获取切除GST标签的重组蛋白。研究指出凝血酶柱上切除GST标签获得目的蛋白。该文章发表在2012年07期的《中国公共卫生》上。
采用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组表达质粒Lpp20/pGEX-4T-1在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达，收集菌体并采用反复冻融、溶菌酶裂解及超声破菌3种细胞破碎方法，表达产物在谷胱甘肽琼脂糖树脂4B柱上纯化，利用凝血酶切除GST标签，用鼠抗Lpp20单克隆抗体进行纯化产物western blot鉴定。
高效表达出Lpp20-GST融合蛋白，相对分子质量约为4.5 kDa，产物以部分可溶性形式表达，凝血酶成功切除GST标签，纯化产物能被鼠抗Lpp20单克隆抗体识别。
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