肝脏纤维化中SOX9的细胞外基质靶目标确定提供了新的疾病标志物
肝纤维化是死亡率和发病率高的主要病因，以激活的肝星状细胞（HSCs）分泌过多的细胞外基质（ECM）沉积为主要特征。这些结果也提供了一些线索，那就是否还存在其他SOX9 ECM靶目标，可作为肝纤维化的疾病分期和进展的潜在诊断性标志物。
背景与目的：肝纤维化是死亡率和发病率高的主要病因，以激活的肝星状细胞（HSCs）分泌过多的细胞外基质（ECM）沉积为主要特征。虽然存在潜在的可逆性，目前诊断方法是非侵入性的。迫切需要确定纤维化活性和疾病进展的非侵入性标志物。我们确定了Sry-box转录因子，SOX9，在激活的HSCs中异位表达，可调节促纤维化ECM蛋白Ⅰ型胶原（COL1）和骨桥蛋白（OPN）的表达。本研究目的是确定纤维化中新型SOX9的靶目标，并评估其作为生物标志物的适用性。
方法：分离大鼠HSCs，并在塑料平板中培养激活。应用siRNA终止Sox9表达。应用affymetrix平台进行RNA微点阵分析，并通过qPCR和蛋白质印迹法确认。应用ELISA检测Trent丙型肝炎队列（n=147）的血清标本从而确定靶目标。
结果：通过微点阵分析确定了高度基因表达的20例患者。在Sox9敲除的HSCs中，确定Opn、骨粘连蛋白（SPARC）、骨活素（GPNMB）、纤维连接蛋白（FN）和波形蛋白（VIM）为潜在的下游靶目标。硅片分析揭示所有5个基因的调节区都存在保守的SOX9结合位点。在激活的HSCs中，靶目标表达显著增加，并在血清中进一步增加。患者血清标本的分析证实进展性纤维化中所有蛋白浓度都增加。受试者工作曲线分析表明它们鉴别肝硬化的AUROC为：0.781—OPN，0.705—VIM，0.69—SPARC，0.716—GPNMB和0.429—FN，其他纤维化分期的鉴别具有相似结果。第二个验证队列确认了这些结果，我们对健康对照者和HCV阳性的任意纤维化分期患者进行鉴别的AUROC为：0.797—OPN，0.876—VIM，0.834—SPARC， 0.457—GPNMB和0.597—FN。
结论：我们先前的研究已经确定OPN与纤维化进展相关，其可以作为肝脏疾病的生物标志物，同时也是新的SOX9下游靶目标。本研究确定了其他新的SOX9靶目标，如FN、VIM、SPARC和GPNMB，它们也是参与纤维化中ECM沉积的主要核心因子。我们的数据表明在HCV阳性患者的血清中，这些靶目标表达也增加，且单个或组合靶目标可以作为肝纤维化的潜在生物学标志物。此外，这些结果也提供了一些线索，那就是否还存在其他SOX9 ECM靶目标，可作为肝纤维化的疾病分期和进展的潜在诊断性标志物。
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