耳鼻咽喉

siRNA干扰β-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的研究

作者:杨俊岭 整理 来源:金宝搏网站登录技巧 日期:2015-09-21
导读

           近期,广州市第十二人民医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文,旨在探讨siRNA干扰-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的变化。研究指出,干扰-catenin的表达能有效增强喉癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,与顺铂协同促进Hep-2细胞的凋亡。这可为减少喉癌化疗药物的用量及减轻其不良反应提供了理论支持。该文发表在2015年第12期《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》上。   利用RNA

  近期,广州市第十二人民医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文,旨在探讨siRNA干扰β-catenin基因表达后喉癌Hep-2细胞对顺铂化疗敏感性的变化。研究指出,干扰β-catenin的表达能有效增强喉癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,与顺铂协同促进Hep-2细胞的凋亡。这可为减少喉癌化疗药物的用量及减轻其不良反应提供了理论支持。该文发表在2015年第12期《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》上。

  利用RNA干扰技术干扰喉癌Hep-2细胞β-catenin基因,用RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白水平检测目的基因干扰效果;实验分为siRNA-β-catenin-Hep-2干扰组、阴性对照组、空白对照组;MTT法检测不同浓度顺铂对3组细胞的增殖抑制率并计算半数抑制有效药物浓度(IC50值),流式细胞仪检查3组细胞相同浓度顺铂刺激后凋亡率的变化。

  合成的β-catenin-siRNA干扰片段可以特异性下调β-catenin基因mRNA和蛋白的表达水平;RTPCR检测说明siRNA-β-catenin-Hep-2干扰组mRNA相对表达量较空白对照组下降达70%(P<0.05),Western blot结果显示干扰组β-catenin蛋白相对表达为(0.545±0.111),较空白对照组(1.507±0.139)和阴性对照组(1.429±0.089)明显下降(P<0.05)。通过计算软件得出顺铂对3组细胞的IC50值,β-cateninRNAi干扰组和空白对照组IC50分别值为(5.81±0.46)、(10.10±1.01)μg/ml,2组之间的差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,β-catenin-RNAi干扰组细胞凋亡率为(26.15±0.60)%,明显高于空白对照组的(14.16±0.05)%,差异有统计学意义(P<0.05)。

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